miR-34b甲基化在白血病细胞增殖中的影响

• 作者: 古桂雄 曹岚 柴忆欢 潘健 王娜 胡绍燕 赵文理
• 来源期刊: 中华儿科杂志
• 关键词: 白血病 细胞增殖 DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 840-845
• 页数: 6页
• 字数: 5292字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0578-1310.2014.11.011

摘要

目的 研究miR-34b在白血病细胞株的表达及其启动子区CpG岛甲基化状态,探讨miR-34b甲基化对白血病细胞增殖的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测8种白血病细胞株(U937、HL-60、MV4-11、M2R、K562、Raji、CCRF、DAMI) miR-34b的相对表达量,选择同期20例非血液病患儿骨髓细胞作为对照并与其比较.采用甲基化特异PCR检测miR-34b在8种白血病细胞株miR-34b的甲基化程度,选择同期23例非血液病患儿骨髓细胞作为对照并与其比较.地西他滨(5-aza-2-dC)处理HL60及K562细胞,检测其甲基化状态及miR-34b的相对表达量.采用脂质体转染hsa-miR-34b到K562细胞、通过流式细胞仪检测转染效率、CCK-8法检测各时期hsa-miR-34b转染组细胞增殖情况并与未转染组、阴性对照转染组比较.结果 miR-34b在非血液病患儿骨髓细胞、白血病细胞株组的相对表达量分别为5.22±1.15、0.03±0.03,白血病细胞株组与非血液病患儿骨髓细胞相比,差异有统计学意义(t=4.538,P＜0.叭).8种白血病细胞株均出现甲基化现象,其甲基化阳性率为100％;23例非血液病患儿骨髓细胞,无一例出现甲基化现象.5-aza-2-dC处理白血病细胞株HL-60及K562后,其甲基化条带均明显减弱,miR-34b的相对表达量均明显升高,分别为处理前的49.5倍和18.8倍.脂质体转染hsa-miR-34b到K562细胞其转染效率为61％,CCK-8法检测hsa-miR-34b转染组各时期均出现细胞增殖抑制作用,与阴性对照转染组相比,差异有统计学意义(48 h:t=9.303,P＜0.01;72 h:t=65.617,P＜0.01;96 h:t =36.878,P ＜0.01;120 h:t=18.748,P＜0.01).抑制率分别为12.2％、45.7％、32.5％、22.9％,其中72 h抑制作用最明显.结论 启动子区CpG岛甲基化使miR-34b在白血病细胞株表达降低,导致细胞增殖抑制作用减弱,可能是白血病发生或发展的原因之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柴忆欢	苏州大学附属儿童医院血液肿瘤科	85	249	8.0	10.0
2	赵文理	苏州大学附属儿童医院血液肿瘤科	31	180	7.0	12.0
3	胡绍燕	苏州大学附属儿童医院血液肿瘤科	79	238	7.0	10.0
4	王娜	苏州大学附属儿童医院血液肿瘤科	6	20	3.0	4.0
5	曹岚	苏州大学附属儿童医院血液肿瘤科	8	14	2.0	3.0