miR-34b调控去泛素化酶USP22在急性髓细胞白血病细胞HL60中的生物学作用

• 作者: 丁志勇 刘娟娟 彭攸 朱斌 潘韶英 王素丽 肖林林 赵文理 魏取好
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-34b USP22 急性髓细胞白血病 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 210-214
• 页数: 5页
• 分类号: R342.3
• 字数: 3455字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2019.03.000

摘要

目的 研究miR-34b调控其靶基因USP22分子机制及其在急性髓细胞白血病细胞HL60中的生物学效应.方法 荧光定量PCR (qPCR)检测miR-34b、USP22转录水平;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测USP22、Bax、Bcl-2蛋白表达水平;急性髓细胞白血病HL60细胞中过表达、抑制miR-34b或干扰USP22后,CCK-8及Annexin-V分别检测细胞增殖活性及凋亡变化.双荧光素酶报告基因系统证实miR-34b与USP22的3’非编码区(3’-UTR)相互作用.结果 miR-34b在白血病细胞HL660中表达下调,为外周血健康对照单个核细胞的0.46±0.07倍(P＜0.01).与对照细胞相比,在HL60细胞中过表达miR-34b或抑制miR-34b后,细胞相对活性分别出现减低或增强现象(P＜0.01).miR-34b在HL60中过表达后,凋亡细胞(29.91 ±1.14)％较对照细胞(8.77±0.23)％增加了2.41倍(P＜0.01),Western印迹检测证实了促凋亡分子Bax及抑制凋亡分子Bcl-2在miR-34b过表达后分别出现了上调及下调现象.利用在线预测软件预测USP22可能是miR-34b直接调控基因.在HL60细胞中过表达或抑制miR-34b后,USP22转录水平及蛋白表达水平均不同程度上调及下调(P＜0.01).双荧光素酶报告基因系统证实miR-34b过表达后,USP22野生型的3’-UTR较对照组显著下调(P＜0.01),而突变型无显著改变.进一步敲减USP22后HL60细胞增殖活性减低,并诱导细胞凋亡.结论 miR-34b对白血病细胞HL60的抑癌活性可部分通过抑制USP22得以实现;同时过表达miR-34b或抑制USP22表达有望成为急性髓细胞白血病的诊治靶点.