以重组肺炎球菌表面黏附素A 为载体蛋白的流感嗜血杆菌多糖结合疫苗的实验研究

• 作者: 吴娟 徐江红 范小勇 薛红刚 郭蓉 陈泽宇
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 肺炎球菌表面黏附素 B 型流感嗜血杆菌 多糖蛋白结合疫苗 免疫原性 免疫保护
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 疫苗学
• 页码范围: 933-940
• 页数: 8页
• 字数: 6196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2014.12.008

摘要

目的：研究以肺炎球菌表面黏附素（PsaA）为蛋白载体的 b 型流感嗜血杆菌（Hib）多糖结合疫苗的制备及其免疫原性和免疫保护作用。方法用基因工程技术制备 PsaA 基因重组蛋白（rPsaA），通过酰胺缩合法与 Hib 多糖偶联结合，制成结合疫苗（Hib-PsaA）。用此疫苗免疫接种3周龄幼鼠，同时以破伤风类毒素和 B 型流感嗜血杆菌（Hib）多糖结合疫苗（Hib-TT）接种小鼠作为对照及磷酸盐缓冲液（PBS）接种作空白对照。末次免疫后2周观察小鼠对 Hib 多糖和 PsaA 蛋白的免疫原性应答；同时以肺炎球菌分别注入免疫后小鼠和未免疫的对照小鼠听泡，分别于攻击后第3天和第7天观察小鼠中耳内细菌清除率和中耳炎症反应情况，观察新型疫苗的免疫保护作用。结果以基因工程技术成功制备并纯化 rPsaA 蛋白，并运用酰胺缩合法与 Hib 多糖偶联结合，结合物的洗脱峰前移，证明偶联成功。接种该结合疫苗的小鼠产生的抗 PsaA 的抗体 IgG 几何平均滴度（GMT）为4525；抗 Hib 抗体 IgG 的 GMT 为1393。在接种 Hib-TT 疫苗的对照组中，小鼠产生的抗 Hib 抗体 GMT 为1493，两种疫苗的抗 Hib 抗体 GMT 差异无统计学意义，但是 Hib-PsaA 结合疫苗显示出对肺炎球菌的免疫应答，优于以破伤风类毒素为载体的结合疫苗。细菌攻击后第3天实验组小鼠中耳细菌清除率明显高于对照组，组织病理学检查实验组小鼠细菌攻击后第3天和第7天中耳炎症反应明显轻于对照组，显示了 Hib-PsaA 结合疫苗针对肺炎球菌的有效免疫保护作用。结论运用基因工程技术可获得高纯度、高产量的 rPsaA 蛋白，以酰胺缩合法可成功将 rPsaA 蛋白与 Hib 多糖偶联结合，所制备的多糖蛋白结合疫苗在幼小鼠体内可诱导针对 rPsaA 蛋白与 Hib 多糖的免疫应答反应，并且可有效预防肺炎球菌导致的急性中耳炎。提示该疫苗免疫可以在预防 Hib 感染性疾病的同时，对肺炎链球菌导致的急性中耳炎可能有一定的预防作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛红刚	武汉生物制品研究所细菌疫苗研究室	14	48	5.0	6.0
2	徐江红	复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻喉科	11	16	2.0	3.0
3	范小勇		13	31	3.0	5.0
4	陈泽宇	复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻喉科	9	44	3.0	6.0
5	吴娟		9	41	4.0	6.0
6	郭蓉	武汉生物制品研究所细菌疫苗研究室	8	5	1.0	1.0