pshuttle-Egr-1-hSmac质粒联合X线照射对乳腺癌MDA-MB-435细胞增殖的抑制作用

• 作者: 李艳博 林承赫 梁硕 王志成 郭彩霞 龚守良
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: Smac基因 Egr-1 启动子 X射线 基因-放射治疗 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 913-919
• 页数: 7页
• 分类号: R737.9
• 字数: 5163字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20140501

摘要

目的：构建 pshuttle-Egr-1-hSmac质粒并转染人乳腺癌 MDA-MB-435细胞，观察其抑制肿瘤细胞的辐射增敏作用。方法：转染 pshuttle-Egr-1-hSmac质粒的 MDA-MB-435细胞经过2 Gy X线照射不同时间（4、8、12、24和48 h）和0.5～5.0 Gy X线照射后24 h 收集细胞，采用 RT-PCR 和 Western blotting 法检测 Smac mRNA 及其蛋白表达。将细胞分为对照组、pshuttle 质粒组、pshuttle-Egr-1-hSmac 质粒组、2 Gy 组、pshuttle＋2.0 Gy组和 pshuttle-Egr-1-hSmac＋2.0 Gy组，MTT法检测各组细胞增殖；克隆形成实验检测细胞存活能力；Annexin Ⅴ-FITC双染法检测细胞凋亡；PI单染法检测细胞周期。结果：对照组和 pshuttle质粒组MDA-MB-435细胞中 Smac mRNA无表达，而 pshuttle-Egr-1-hSmac质粒组 MDA-MB-435细胞 Smac mRNA表达水平随时间延长逐渐升高，于24和48 h时表达水平最高；经0.5～5.0 Gy X线照射后24 h MDA-MB-435细胞Smac mRNA表达水平随照射剂量增加而逐渐增加，在2.0和5.0 Gy X线照射后Smac mRNA表达水平最高。pshuttle-Egr-1-hSmac质粒组4、8、12和24 h后 Smac蛋白表达水平逐渐升高，24 h后表达水平最高。经过0、0.5、1.0、2.0和5.0 Gy X线照射后24 h Smac蛋白表达水平逐渐升高，尤其以5.0 Gy X线照射时表达水平最高。MTT法检测时程效应，2.0 Gy、pshuttle＋2.0 Gy和 pshuttle-Egr-1-hSmac＋2.0 Gy质粒组24、48和72 h细胞 A490值明显低于对照组（P＜0.01）；剂量效应，pshuttle-Egr-1-hSmac 质粒组1.0～5.0 Gy X 线照射后， MDA-MB-435细胞 A490值明显低于0 Gy X线照射（P＜0.05或P＜0.01）。pshuttle-Egr-1-hSmac质粒组细胞存活分数明显低于对照组（P＜0.01）。pshuttle-Egr-1-hSmac＋2.0 Gy组细胞凋亡率明显高于2.0 Gy组（P＜0.01）， G0/G1期和 S期细胞百分率明显低于2.0 Gy照射组（P＜0.01）， G2/M期细胞百分率明显高于2.0 Gy组（P＜0.01）。结论：X线照射能增加 pshuttle-Egr-1-hSmac质粒转染的 MDA-MB-435细胞有效表达 Smac mRNA及蛋白，能抑制细胞存活，且诱导 G2/M期阻滞和凋亡增加；Smac基因联合放射治疗可明显增加乳腺癌细胞的放射敏感性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李艳博	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室	60	244	9.0	13.0
3	龚守良	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室	138	848	15.0	21.0
4	郭彩霞	首都医科大学公共卫生与家庭医学学院	59	258	9.0	12.0
5	王志成	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室	64	216	8.0	11.0
6	梁硕	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室	27	83	5.0	8.0