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家蚕免疫负调控分子BmFAF的功能
家蚕免疫负调控分子BmFAF的功能
作者:
夏庆友
李亚明
王菲
胡翠美
马晓娟
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
家蚕
免疫负调控
BmFAF
表达特征
抗菌肽
存活率
摘要:
在细胞和个体水平上探讨家蚕BmFAF的免疫负调控功能,为研究昆虫免疫稳态提供参考。通过RT-PCR技术克隆BmFAF并进行结构域预测和分析;利用荧光定量PCR检测BmFAF在家蚕各龄期以及5龄第3天幼虫的各组织中的时空表达特征和家蚕感染细菌后的免疫诱导表达特征;构建BmFAF的细胞表达载体以及合成用于RNAi的dsRNA,通过质粒或dsRNA的转染在BmE细胞中过表达BmFAF或降低BmFAF的表达水平,并利用Western blotting或定量PCR予以确认,同时检测抗菌肽基因表达水平的变化;通过注射dsRNA在个体中降低BmFAF的表达水平,并检测BmFAF对抗菌肽基因表达水平和家蚕感染细菌后存活率的影响。BmFAF与其他物种FAF家族成员有较高的同源性,与人类HsUBXD8、HsFAF1和果蝇DmCaspar分别具有60%、42%和47%的相似性,并具有保守的 UBX 结构域。时空表达特征分析表明,除生殖腺外,BmFAF在免疫组织中表达量略高于其他组织,眠蚕期表达量显著高于起蚕期,尤其在2龄和3龄眠蚕中的表达量最高;5龄时BmFAF的表达量普遍较低,而从5龄发育至预蛹期时,BmFAF的表达水平有所上升。免疫诱导表达谱显示,家蚕在注射感染黑胸败血芽孢杆菌或黏质沙雷氏菌0.5 h后,脂肪体中BmFAF的表达水平即显著下降,且在12 h内没有恢复,而抗菌肽BmCecropinA1的表达则持续上升,并在12 h时达到最高。在BmE细胞中过表达BmFAF,抗菌肽BmCecropinA1、BmAttacin和BmMoricin的表达水平与转染对照质粒的细胞中的抗菌肽相比,均显著降低。在细胞中转染 dsRNA 后,BmFAF的表达水平被有效地降低50%-60%,抗菌肽BmCecropinA1和BmMoricin的表达水平与对照相比均显著升高。对5龄第2天家蚕幼虫注射dsRNA,24 h后通过荧光定量PCR检测到BmFAF的表达水平在注射dsFAF的家蚕中下降至注射dsEGFP对照中的45%;而抗菌肽BmCecropinA1和BmMoricin、BmAttacin的表达水平均被显著上调。这些家蚕通过注射感染黏质沙雷氏菌24 h后,死亡率即低于对照组,在感染72 h后仍有40%左右的家蚕存活,而对照组中则无家蚕存活。结构分析、表达特征以及细胞和个体水平上的功能研究表明,BmFAF是一个具有免疫负调控作用的分子,通过抑制抗菌肽的表达维持家蚕免疫稳态,而降低BmFAF的表达水平则导致抗菌肽表达水平升高,从而有助于减缓甚至避免家蚕在感染细菌后的死亡。
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文献信息
篇名
家蚕免疫负调控分子BmFAF的功能
来源期刊
中国农业科学
学科
关键词
家蚕
免疫负调控
BmFAF
表达特征
抗菌肽
存活率
年,卷(期)
2014,(15)
所属期刊栏目
畜牧?兽医?资源昆虫
研究方向
页码范围
3085-3093
页数
9页
分类号
字数
语种
中文
DOI
10.3864/j.issn.0578-1752.2014.15.018
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
夏庆友
西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室
103
602
14.0
20.0
2
王菲
西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室
34
183
10.0
12.0
3
胡翠美
西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室
2
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2.0
2.0
4
李亚明
西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室
2
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马晓娟
西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室
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引证文献(2)
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2020(2)
引证文献(0)
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研究主题发展历程
节点文献
家蚕
免疫负调控
BmFAF
表达特征
抗菌肽
存活率
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
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相关学者/机构
期刊影响力
中国农业科学
主办单位:
中国农业科学院
出版周期:
半月刊
ISSN:
0578-1752
CN:
11-1328/S
开本:
大16开
出版地:
北京中关村南大街12号
邮发代号:
2-138
创刊时间:
1960
语种:
chi
出版文献量(篇)
9193
总下载数(次)
12
总被引数(次)
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