鸽源新城疫病毒F基因的克隆与原核表达

• 作者: 时永杰 贺泂杰
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸽 新城疫病毒 F基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 页码范围: 742-746
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR方法扩增了鸽源新城疫病毒F基因并将其克隆至pMD18-T载体,测定其核苷酸序列.根据F基因CDS序列,设计原核表达引物,扩增F基因功能区片段,并构建了重组原核表达质粒pGEX4T-1-NDV F(924),在不同时间和温度下进行诱导表达.通过SDS-PAGE检测,目的基因表达出约60 ku的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,表达目的蛋白的最佳诱导时间为6h,最佳诱导温度为42℃;提取并纯化包涵体蛋白,用其免疫BALB/c小鼠,采小鼠血进行ELISA检测.结果显示,表达蛋白具有良好的免疫原性和反应原性.上述结果表明,缺失疏水区的F基因可以在大肠杆菌BL21 (DE3)中获得表达,表达的重组F蛋白具有良好的免疫原性和反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	时永杰	中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所	12	161	5.0	12.0
2	贺泂杰	中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所	17	21	3.0	3.0