虫卵ITS-2序列分析鉴别华支睾吸虫和扇棘单睾吸虫的研究

• 作者: 区方奇 吕国丽 唐雯茜 张伟尉 杨益超 林源 蒋智华 韦海艳 黄福明
• 来源期刊: 内科
• 学科: 医学
• 关键词: 华支睾吸虫 扇棘单睾吸虫 ITS-2 鉴别方法
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 128-131,123
• 页数: 5页
• 分类号: R447
• 字数: 3271字
• 语种: 中文

摘要

目的：建立以分子生物学技术为基础的华支睾吸虫与扇棘单睾吸虫的ITS-2序列分析鉴别方法。方法在华支睾吸虫流行区采集华支睾吸虫和扇棘单睾吸虫成虫,从成虫虫体分离并收集虫卵。以蛔虫、鞭虫、钩虫、蛲虫做对照虫种,按不同虫种和虫卵数分成5个实验组,各组分别提取DNA,并扩增ITS-2序列,对扩增产物进行测序并作同源性分析以确保为目标片段,根据PCR扩增产物电泳获得的条带判定虫种。结果以华支睾吸虫和扇棘单睾吸虫虫卵DNA为模板的PCR产物电泳图谱分别在400bp、500bp左右各显示一条明显条带；在以两种虫卵DNA混合液为模板的PCR产物中,电泳图谱在400bp左右和500bp左右各显示明显条带。将测序得到的两种核苷酸序列进行Blast比对后,显示与 GenBank中相应的华支睾吸虫和扇棘单睾吸虫序列高度同源。混入四种肠道线虫虫卵DNA的PCR产物中,除目的条带外,无其他条带。结论该方法可以对华支睾吸虫及扇棘单睾吸虫虫卵进行鉴别,且结果不受常见四种肠道线虫虫卵干扰,敏感性和特异性较高,可作为两虫种的鉴别检测方法。