Hsa-miR-150过表达诱导弥漫大B淋巴瘤细胞系OCI-Ly10再分化

• 作者: 严金海 周新华 王志强 简文静 葛娟 赵彤 陈少红 韩西群
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弥漫大B细胞淋巴瘤 分化 Hsa-miR-150 基因,c-myb
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 226-232
• 页数: 7页
• 分类号: R329.21
• 字数: 4965字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.02.006

摘要

目的:探究hsa-miR-150过表达诱导弥漫大B淋巴瘤细胞系OCI-Ly10再分化的机制.方法:运用real-time PCR检测hsa-miR-150在永生化CD19+B细胞和OCI-Ly10细胞中的表达,利用Western blotting和免疫荧光细胞化学检测hsa-miR-150靶基因c-myb的表达;通过LipofectamineTM 2000脂质体法将含有重组慢病毒质粒的病毒上清转染OCI-Ly10细胞(Ly10-control组和Ly10-miR-150组);对新构建的细胞亚系,通过MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡;运用real-time PCR、免疫荧光细胞化学和Western blotting检测Ly10-control 和Ly10-miR-150的B细胞分化相关基因及c-Myb的表达;利用干扰片段干扰OCI-Ly10细胞c-myb表达后,运用real-time PCR和Western blotting检测干扰效率及干扰后转录调节因子BCL6和浆细胞分化开关蛋白PRDM1的表达.结果:(1)CD19+B淋巴细胞的hsa-miR-150表达量明显高于OCI-Ly10细胞(P＜0.05);c-Myb在OCI-Ly10细胞中表达较强,而在CD19+B淋巴细胞表达较弱.(2)OCI-Ly10细胞经转染hsa-miR-150后,B细胞分化相关基因的表达都明显发生了变化,B细胞特异性激活蛋白(PAX5)和BCL6表达下调(P＜0.05);干扰素调节因子4(IRF4)、PRDM1和X盒结合蛋白1(XBP1)的表达上调(P＜0.05);和对照组相比,c-Myb在Ly10-miR-150细胞中表达明显下调(P＜0.05).(3)干扰OCI-Ly10细胞c-myb表达后,BCL6表达明显下调,而PRDM1表达明显上调.结论:(1) hsa-miR-150过表达对OCI-Ly10细胞抑制增殖和诱导凋亡作用非常明显.(2)过表达hsa-miR-150可诱导该瘤细胞向末端B细胞方向分化,作用机制可能与下调其靶基因c-myb的表达有关.