水通道蛋白11参与马兜铃酸损伤人肾小管上皮细胞的体外实验

• 作者: 姚卫国 彭文 池杨峰 王云满 王浩 邢丽娜
• 来源期刊: 上海中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 马兜铃酸 肾小管上皮细胞 水通道蛋白11 纤维化
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 实验中医
• 页码范围: 68-73
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨马兜铃酸(AA)对人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤机制及水通道蛋白11(AQP11)在损伤过程中的作用.方法:将不同浓度的AA(10、20、40 μg/ml)作用于体外培养的HK-2细胞,用四甲基偶氮唑盐法(MTT)选择最适浓度AA;用AQP11过表达质粒转染至HK-2细胞并验证,用以观察AQP11是否对AA诱导HK-2细胞转分化具有保护作用.予未转染及转染HK-2细胞分别加入最适浓度AA培养48 h,用ELISA法检测细胞上清液中转化生长因子-β1 (TGF-β1)含量,Real-time PCR检测AQP11 mRNA表达,Western印迹法检测AQP11、结缔组织生长因子(CTGF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达.结果:MTT法筛选出的AA最适浓度为20 μg/ml;转入质粒过表达AQP11培养48 h后AQP11的表达量显著高于空白组(P＜0.01),提示转染成功.加入20 μg/ml AA后,ELISA检测显示,未转染组的TGF-β1表达量较空白组明显上升(P＜0.05),至48 h达高峰(P＜0.01),而转染APQ11质粒组则明显低于未转染组(P＜0.05);PCR检测显示,未转染组AQP11 mRNA的表达量逐渐降低,至72 h显著低于空白组(P＜0.05),而转染组虽低于空白组(P＜0.05),但略高于未转染组(P =0.137);Western印迹法检测显示,未转染组α-SMA、CTGF蛋白表达较空白组明显上升(P＜0.01)、AQP11蛋白逐渐降低(P＜0.05),转染组48 h的α-SMA、CTGF蛋白表达量均较空白组有所提高(P =0.874,P=0.696),但显著低于未转染组(P＜0.01).结论:AA可抑制HK-2细胞增殖,诱导细胞纤维化、坏死;过表达AQP11蛋白可以抑制AA作用下的细胞纤维化发生发展,AQP11表达调控异常可能是AAN的一个重要发病机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭文		83	355	10.0	14.0
2	王浩		49	135	7.0	10.0
3	邢丽娜		20	134	7.0	11.0
4	王云满		37	132	7.0	10.0
5	姚卫国		11	22	2.0	4.0
6	池杨峰		8	4	1.0	2.0