不同粪便DNA提取试剂盒及样本储存时间对粪便人基因组DNA提取率的影响

• 作者: 刘云龙 周国华 李思勤 王勇 邹秉杰
• 来源期刊: 临床误诊误治
• 学科: 医学
• 关键词: 试剂盒,诊断 储存时间 DNA 粪便
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 医技检查与临床诊断
• 页码范围: 77-80
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 字数: 2991字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-3429.2014.04.033

摘要

目的 比较不同粪便DNA提取试剂盒及粪便样本不同储存时间对粪便人基因组DNA提取效率的影响.方法 对18例体检健康者使用QIAamp DNA Stool Mini Kit,MO BIO UltraClean(R) Fecal DNA Isolation Kit,E.Z.N.A.Mag Bind Stool DNA Kit 3种粪便DNA提取试剂盒进行粪便DNA提取,通过紫外分光光度法对总DNA产量和纯度进行分析,通过实时荧光聚合酶链反应(PCR)方法对提取产物中结肠腺瘤性息肉病基因进行定量,并比较人基因组DNA提取效率的差异及不同样本储存时间对其影响.结果 在3种试剂盒中,QIAamp DNA Stool Mini Kit对人基因组DNA的提取产量最高(平均67.81 ng/g),E.Z.N.A.Mag Bind Stool DNA Kit提取产物纯度最高(A260/A280平均2.07),MO BIO UltraClean(T) Fecal DNA Isolation Kit操作耗时最短(约40 min);粪便样本在-70℃条件下储存30 d内,不同储存时间对总DNA提取效率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 QIAamp DNA Stool Mini Kit对粪便人基因组DNA的提取效率最高,且于-70℃储存粪便样本30 d内对人基因组DNA提取效率无影响.