传染性支气管炎病毒非结构蛋白nsp10单克隆抗体的制备

• 作者: 凌吉飞 周继勇 廖敏 雷静
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性支气管炎病毒(IBV) 非结构蛋白10(nsp10) 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 页码范围: 846-851
• 页数: 6页
• 分类号: S852.43|S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

为了体外获得大量表达的传染性支气管炎病毒(IBV)的非结构蛋白10(nsp10)并制备其单克隆抗体,通过RT-PCR扩增获得了IBV nsp10基因,并将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中.重组载体pET-28a(+)-nsp10转化的表达宿主菌在1 mmol/L IPTG诱导5h获得高效表达.用纯化的重组蛋白His-nsp10免疫小鼠制备单克隆抗体,采用有限稀释法经过3轮筛选和鉴定最终获得了2株分泌抗nsp10单克隆抗体的细胞株1G2和3G7.2株单克隆抗体在Western-blot分析中均与重组His-nsp10蛋白反应,并通过间接免疫荧光试验识别了4种不同毒株感染的DF-1细胞.IBV nsp10单克隆抗体的成功制备为IBV的检测和nsp10蛋白功能的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周继勇		86	753	16.0	23.0
2	廖敏		38	913	15.0	30.0
3	雷静		2	2	1.0	1.0
4	凌吉飞		1	0	0.0	0.0