牛结核病PPDB-PE-C-IFN-γ诊断方法的建立

• 作者: 呼西旦 张喜悦 曹青 曾巧英 杜鹏飞 田莉莉 范伟兴 许芳
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: IFN-γ 牛结核病 PPDB ESAT-6 CFP-10
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 页码范围: 852-856
• 页数: 5页
• 分类号: S855.2
• 语种: 中文

摘要

对结核分枝杆菌复合群致病菌株的特异性抗原ESAT-6 (PE)和CFP-10(PC)分别进行原核表达并纯化.用PPDB、PE、PC和PE-C(PE、PC等量混合)作为4种刺激抗原(以PPDB作为参照),分别体外平行刺激56份已知的牛结核病阳性牛全血和460份阴性牛全血,孵育、收获血浆,采用间接ELISA检测产生的IFN-γ水平.经统计学分析,绘制ROC曲线,分别确定PPDB-IFN-γ、PE-IFN-γ、PC-IFN-γ和PE-C-IFN-γ的阳性判定最佳临界点及其敏感性和特异性;并据此进一步分析PPDB分别与PE、PC或PE-C联用(PPDB-PE-IFN-γ、PPDB-PC-IFN-γ、PPDB-PE-C-IFN-γ,串联和并联)的敏感性和特异性.结果显示,PE、PC的分子质量分别为27.8 ku和16.4 ku; PPDB-IFN-γ的最佳临界点为0.02,其敏感性和特异性分别为94.6％和92.2％,PE、PC、PE-C的最佳临界点相同,均为0.01,其中PE-C-IFN-γ的敏感性和特异性最高,分别为92.9％和95.7％;联用时,PPDB-PE-C-IFN-γ的敏感性和特异性最高,其串联时敏感性和特异性分别为89.3％和96.5％,并联时分别为98.2％和91.3％.PE-C-IFN-γ的敏感性比PPDB-IFN-γ低1.7％,但特异性高3.5％;PPDB-PE-C-IFN-γ并联时,敏感性比PPDB-IFN-γ高3.6％,串联时特异性比PPDB-IFN-γ高4.3％.结果表明,本试验建立的PPDB-PE-C-IFN-γ诊断方法具有高敏感性和高特异性,具有极大的应用价值.