下调VEGF表达影响鼻咽癌细胞放射敏感度的机制

• 作者: 丰大利 周海波 尹宜发 李欣 杨丽 杨凡 胡艳 钱莉
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻咽癌 血管内皮生长因子 RNA干扰 放射敏感度
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 740-744
• 分类号: R739.63
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2014.07.012

摘要

目的 应用RNA干扰技术抑制人鼻咽低分化鳞状上皮细胞癌细胞株CNE-2中血管内皮生长因子(VEGF)表达,研究阻断VEGF基因表达对鼻咽癌细胞放射敏感度的影响及机制.方法 构建针对VEGF的siRNA真核表达载体pU-VEGF-siRNA(CNE-2组)、1个阴性对照质粒(CNE-2/Neg-siRNA组)、经脂质体转染至CNE-2细胞(CNE-2/VEGF-siRNA组),用平板克隆形成实验检测在6MV-X线0、2、4、6、8、10 Gy照射后克隆形成能力及通过单击多靶模型、线性二次模型拟合放射生物学参数,流式细胞检测分析细胞周期和细胞凋亡的变化,用RT-PCR定量分析三组细胞中CyclinDl、CyclinE、P16和P53的mRNA表达.结果 经6MV-X线0、2、4、6、8、10 Gy照射后细胞存活率显著下降,CNE-2/VEGF-siRNA组细胞经D0和2 Gy照射后的存活分数明显低于CNE-2组、CNE-2/Neg-siRNA组;CNE-2/VEGF-siRNA组中G1/S期细胞周期阻滞更为明显.在Cyclin D1、Cyclin E、p16和p53基因中,Cyclin DlmRNA表达在放疗后6、12和24 h进行性升高,差异有统计学意义,而其他基因变化差异无统计学意义,Western blot检测显示Cyclin D1蛋白表达在放疗后24 h明显升高.结论 下调VEGF表达可增加鼻咽癌细胞的放射敏感度,其机制可能是通过Cyclin D1信号通路途径使细胞周期发生G1/S期阻滞.