miR-144靶向NF-κB受体活化因子配体蛋白调控树突状细胞分泌细胞因子

• 作者: 丁国善 傅志仁 刘芳 宋少华 张磊 邹游 郑玉廷 郭猛 郭闻渊
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: miRNA-144 NF-κB受体活化因子配体蛋白 树突状细胞 细胞因子
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1053-1059
• 分类号: R392.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1008.2014.01053

摘要

目的 探讨miRNA-144对树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟过程中细胞因子分泌的影响及机制.方法 通过对本实验室前期工作中获得的DCs成熟过程中miRNA芯片结果进行数据挖掘,筛选得到DCs成熟过程中显著下调的miRNA(miR)-144,并使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激体外培养的DCs进行验证;检测miR-144转染DCs后相关细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-23)的改变及信号通路(NF-κB、MAPK)活化情况;使用TargetScan预测miR-144的作用靶点并通过双荧光报告系统验证;进一步构建靶蛋白过表达DC2.4细胞系并检测miR-144拟似物转染该细胞系后细胞因子TNF-α mRNA的分泌情况.结果 体外培养的DCs经LPS刺激成熟后miR-144的表达下调(P＜0.01).miR-144拟似物转染DCs后,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-23 mRNA表达均出现下调(P＜0.05,P＜0.01),NF-κB磷酸化水平下降.通过信息学分析发现miR-144的潜在靶点为NF-κB受体活化因子配体蛋白基因(RANKL)并通过双荧光报告系统证明了该结论.在RANKL过表达DC2.4细胞系中转染miR-144拟似物后,TNF-α mRNA的表达不受影响.结论 miR-144靶向RANKL调控DCs细胞因子分泌.