摘要:
背景 骨桥蛋白(OPN)是细胞外基质中的一种黏附蛋白,可促进肿瘤新生血管生成,且新近研究发现抗OPN抗体可抑制肿瘤新生血管的生成.脉络膜新生血管(CNV)与肿瘤新生血管类似,但抗OPN抗体对CNV形成的作用及机制尚不清楚. 目的 探讨抗OPN抗体对激光诱导的小鼠CNV的干预作用及机制.方法 选取SPF级C57BL/6J雄性小鼠40只,用氩激光(514 nm)视网膜光凝法建立小鼠CNV模型.采用随机数字表法将造模成功的36只模型鼠随机分成3个组,分别于光凝后第2天腹腔内注射兔抗小鼠OPN抗体、抗小鼠IgG和PBS各400 μg.模型鼠于光凝后第7天行荧光素眼底血管造影(FFA)检查;光凝后第14天摘除小鼠眼球,每组中任意取4只眼行视网膜色素上皮-脉络膜-巩膜铺片,行荧光抗体染色观察和CNV定量分析;其他8只眼分离脉络膜后用荧光定量PCR法检测各组小鼠脉络膜中OPN mRNA及血管内皮生长因子(VEGF) mRNA的表达,以吸光度(A)表示.结果 FFA检查显示,光凝后第7天可见光斑周围荧光素渗漏,证实CNV已形成.脉络膜铺片荧光显微镜观察结果显示,在激光光斑处可见绿色团状强荧光影,形态如烟花爆破样,证实光凝处CNV形成.根据脉络膜铺片测得抗OPN抗体组、小鼠IgG组和PBS组小鼠CNV面积分别为[(16.98±0.70) ×103] μm2、[(27.13±0.81) ×103] μm2和[(35.39±2.14) ×103] μm2,3个组间差异有统计学意义(F=533.76,P=0.00),其中抗OPN抗体组CNV的面积明显小于小鼠IgG组和PBS组,差异均有统计学意义(q=-3.95、-4.40,P<0.05).荧光定量PCR检测显示,抗OPN抗体组与小鼠IgG组间小鼠脉络膜中OPN mRNA表达量的差异无统计学意义(t=-5.26,P=0.66),而抗OPN抗体组小鼠脉络膜中VEGFmRNA的表达量明显低于小鼠IgG组,差异有统计学意义(t=-6.74,P<0.01). 结论 腹腔内注射抗OPN抗体可下调激光诱导的CNV小鼠模型脉络膜中VEGF的表达,抑制CNV的形成.