miR-21在肾癌细胞中抗凋亡的机制研究

• 作者: 俞能旺 刘毅 刘贞 张爱民 杨先振 郝俊文
• 来源期刊: 国际泌尿系统杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肾肿瘤 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 157-160
• 页数: 4页
• 分类号: R737.11
• 字数: 2019字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4416.2014.02.005

摘要

目的 探讨miR-21在肾癌细胞中抗凋亡的机制.方法 人类肾癌细胞株Caki-l和OS-RC-2细胞,分别以As-miR-21转染沉默miR-21,转染无关乱码寡核苷酸序列作阴性对照以及不转染寡核苷酸的作空白对照,以AnnexinV FITC凋亡检测试剂盒检测凋亡,用Caspase-Glo 3/7试剂测半胱天冬酶3/7活性,用Western Blot分析测定FASL和TIMP3的表达,用荧光素酶报告实验测定miR-21与FASL和TIMP3的结合,将PGL3-WT-TIMP3-3 UTR质粒中miR-21结合位点“AUAAGCU”剪切后用Lipo-fectamine 2000转染至细胞测定As-miR-21对细胞凋亡的影响.结果 转染AS-miR-21的细胞凋亡率相对于阴性和空白对照细胞显著增加(P＜0.05).转染AS-miR-21后48h,Caki-l细胞中半胱天冬酶3/7活性显著增加(P＜0.05).转染PGL3-WT-FASL-3 UTR和PGL3-WT-TIMP3-3UTR质粒的Caki-1和OS-RC-2细胞中沉默miR-21荧光素酶活性显著增加,而转染去除miR-21结合位点的PGL3-MUT-FASL-3UTR和PGL3-MUT-TIMP3-3 LTR质粒的细胞荧光素酶活性不变.将缺乏3'-UTR的TIMP3质粒转染Caki-1和OS-RC-2细胞,再转染miR-21,TIMP3表达不受影响.而细胞过表达TIMP3则凋亡增加,但转染缺乏3'-UTR的TIMP3可以拮抗miR-21导致的抗凋亡作用.结论 miR-21通过FASL和TIMP3多条途径增加肾癌细胞的抗凋亡能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝俊文	济南军区总医院泌尿外科	73	226	7.0	11.0
2	张爱民	济南军区总医院泌尿外科	62	239	8.0	12.0
3	刘贞	济南军区总医院泌尿外科	23	43	4.0	5.0
4	刘毅	济南军区总医院泌尿外科	19	88	4.0	9.0
5	俞能旺	济南军区总医院泌尿外科	18	82	4.0	9.0
6	杨先振	济南军区总医院泌尿外科	6	10	2.0	3.0