shRNA沉默APE/Ref1对体外培养大鼠耳蜗螺旋神经节细胞过氧化氢损伤的影响

• 作者: 向召兰 姜振东 张学渊 李太军 钟诚
• 来源期刊: 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 关键词: 螺旋神经节 RNA,小分子干扰 DNA-(无嘌呤或无嘧啶位点)裂合酶 氧化性应激 过氧化氢
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 145-150
• 页数: 6页
• 字数: 5326字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2014.02.011

摘要

目的 通过转染pGenesil-APE/Ref1-shRNA抑制体外培养大鼠耳蜗螺旋神经节细胞(spiral ganglion cell,SGC)中无嘌呤无嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子1(apurinic/apyrimidimic endonuclase/redox factor 1,APE/Ref1)的表达,观察SGC在过氧化氢(H2O2)所致氧化应激环境中的活性及凋亡情况,探讨APE/Ref1在SGC抗氧化损伤过程中的作用.方法 体外培养大鼠SGC,加入pGenesil-APE/Ref1-shRNA转染72 h,更换培养基后加入不同浓度的H2O2 (0、10、25、50、100、300μmol/L)干预1h,更换正常培养基后继续培养24h.通过免疫印迹、分光光度检测法、原位缺口末端标记法(TUNEL)、四甲基偶氮唑蓝法(MTT)分别检测SGC APE/Refl、磷酸化组蛋白H2AX的表达、caspase3活性、细胞活性以及凋亡情况.结果 pGenesil-APE/Ref1-shRNA能明显抑制APE/Ref1的表达,H2O2损伤浓度在50 ～ 300 μmol/L时,与对照组相比,pGenesil-APE/Ref1-shRNA组磷酸化组蛋白H2AX表达增加,caspase 3活性增加,细胞凋亡率增高,细胞活性降低,差异具有统计学意义(P值均＜0.05).结论 pGenesil-APE/Ref1-shRNA抑制APE/Refl表达后,大鼠体外培养SGC抗氧化损伤能力降低;APE/Ref1可能通过DNA修复功能,实现对SGC的保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学渊	第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉头颈外科	114	486	11.0	18.0
2	钟诚	第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉头颈外科	45	164	6.0	11.0
3	姜振东	第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉头颈外科	26	144	6.0	11.0
4	李太军	第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉头颈外科	2	1	1.0	1.0
5	向召兰	第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉头颈外科	6	20	4.0	4.0