筛选和鉴定抗卵巢癌活性六肽的靶点蛋白

• 作者: 刘琛 唐宜桂 李小勤 秦宜德 雷婷
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乳源抗癌六肽 GST pull-down 诱饵蛋白 捕获蛋白 靶点蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 879-882
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11|R394.2
• 字数: 3690字
• 语种: 中文

摘要

目的：采用 pull-down技术筛选乳源抗癌六肽( PG-PIPN)在人卵巢癌细胞株(SKOV3)上的靶点蛋白(受体)并进行鉴定。方法以 PGPIPN 的序列为参照，设计出 PG-PIPN基因，以BamH Ⅰ/Xho Ⅰ为酶切位点，将PGPIPN基因构建到表达质粒载体pGEX-4T-1中，转化到E. coli BL21中，用诱导剂异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷( IPTG)低温诱导表达的谷胱甘肽S转移酶( GST)标签融合蛋白作为诱饵蛋白；从SKOV3中提取的总蛋白作为捕获蛋白，运用 GST pull-down技术，筛选出靶点蛋白质，运用SDS-PAGE电泳进行初步鉴定，并用异硫氰酸荧光素( FITC)标记的PGPIPN孵育鉴定。结果 SDS-PAGE 电泳中有两条条带，一条为诱饵蛋白，一条为目的条带，在免疫荧光显微镜下观察到荧光PG-PIPN结合到该条带上。结论筛选和鉴定了PGPIPN作用于卵巢癌细胞上的靶蛋白，为研究其抗癌的作用机制及其信号转导通路奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦宜德	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	70	493	11.0	19.0
2	雷婷	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	10	34	4.0	5.0
3	刘琛	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	6	10	2.0	3.0
4	李小勤	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	4	14	2.0	3.0
5	唐宜桂	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	5	16	2.0	4.0