溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 冯旭飞 刀筱芳 李定菲 杨发龙 汤承 王远微
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 溶血性曼氏杆菌 多杀性巴氏杆菌 双重PCR
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 624-629
• 页数: 6页
• 分类号: S852.612
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在建立溶血性曼氏杆菌与多杀性巴氏杆菌的双重PCR检测方法,从而为临床上同时检测这两种病原的感染提供一种更加方便、快捷、准确的工具.根据溶血性曼氏杆菌lkt基因和多杀性巴氏杆菌sp6基因分别设计引物,优化条件后进行特异性和敏感性的评价,并对180份临床样本进行了检测.结果显示,溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌引物的最佳终浓度分别为10和20 pmol/L.该方法的特异性较好,对其他无关病原不检出.对溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的检测限分别为56和22 pg,与独立PCR相同.该方法对临床样本的检测结果表明,溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的检出率分别为51.67％和47.78％.研究结果表明,本研究建立的双重PCR诊断技术具有特异性好、敏感度高等特点,为临床上溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的快速检测、鉴定以及混合感染的流行病学调查提供了有用的工具.