anoctamin 1在中国仓鼠卵巢细胞中的表达及其离子通道特性

• 作者: 张丽 张雲乔 方青 朱杭飞 王皓 许会静 郝峰 鞠晓红
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: anoctamin1 离子通道 卵巢细胞 中国仓鼠
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1226-1231
• 页数: 6页
• 分类号: R361
• 字数: 4868字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20140621

摘要

目的：探讨 anoctamin 1在中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中的表达情况，分析其离子通道特性，为研究钙激活氯离子通道的生理功能提供实验依据。方法：PCR 方法获得 anoctamin 1编码区基因，构建 pcDNA3.1-anoctamin 1真核表达载体。脂质体转染 anoctamin 1至 CHO中，抗生素筛选获取稳定表达 anoctamin 1的 CHO株。应用 RT-PCR技术和倒置荧光显微镜检测 anoctamin 1于 CHO中的表达和分布情况。应用卤族元素敏感的黄色荧光蛋白双突变体 YFP-H148Q/I152L检测 anoctamin 1离子通道的功能。以加入 calcimycin和高浓度碘离子的PBS缓冲液的为实验组，未加入 calcimycin和高浓度碘离子的 PBS缓冲液的为对照组。结果：限制性内切酶酶切后的琼脂糖凝胶电泳和测序，目的基因 anoctamin 1克隆至真核表达载体 pcDNA3.1；RT-PCR和倒置荧光显微镜观察，CHO在mRNA和蛋白水平表达 anoctamin 1，且 anoctamin 1蛋白主要表达于 CHO膜上；荧光淬灭动力学实验，CHO表达的 anoctamin 1具有转运碘离子的作用，且实验组碘离子转运速度显著高于对照组（P＜0.05）。结论：anoctamin 1可高效表达于CHO膜；CHO表达的 anoctamin 1具有经典钙激活氯离子通道特性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鞠晓红		44	119	7.0	9.0