小鼠肺细小动脉平滑肌细胞原代培养和鉴定以及低氧对其增殖与凋亡的影响

• 作者: 唐江锋 王良兴 虞晓明 郭瑞 黄晓颖
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺细小动脉平滑肌细胞 小鼠 低氧 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1724-1728
• 页数: 5页
• 分类号: R332
• 字数: 4604字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.09.032

摘要

目的：建立一种方法简单、重复性好、培养周期短的小鼠肺细小动脉平滑肌细胞（ PASMCs ）原代培养及传代方法，并初步探索低氧下小鼠PASMCs的增殖与凋亡情况。方法：无菌条件显微镜下分离小鼠肺细小动脉，经胶原酶I消化结合血清铺底法培养PASMCs。传代过程中弃除对细胞损伤大的离心步骤。倒置相差显微镜观察细胞形态，免疫细胞化学法和免疫荧光染色法进行α-平滑肌肌动蛋白鉴定，CCK-8显法及TUNEL法测定低氧下PASMCs的增殖与凋亡情况。结果：形态学观察、免疫细胞化学法和免疫荧光染色法鉴定均表明培养的细胞为PASMCs。与大鼠传代后的PASMCs典型的“峰-谷”样生长相比，传代后的小鼠PASMCs形态各异，没有此典型“峰-谷”规律。原代培养后5～7 d即传代，依据细胞活性可传3～5代。 CCK-8法显示，与常氧组24 h比较，低氧组A值升高（P＜0．05）。 TUNEL法结果显示低氧24 h后凋亡率较常氧组下降（P＜0．05）。结论：胶原酶I消化结合血清铺底法培养小鼠PASMCs，方法简单，培养周期短，重复性好，是一种值得推广的小鼠PASMCs体外培养方法。低氧可以促进小鼠PASMCs的增殖，抑制小鼠PASMCs的凋亡。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄晓颖	温州医科大学附属第一医院呼吸循环重点实验室	26	177	7.0	12.0
2	王良兴	温州医科大学附属第一医院呼吸循环重点实验室	39	195	9.0	11.0
3	虞晓明	温州医科大学附属第一医院呼吸循环重点实验室	3	16	2.0	3.0
4	郭瑞	温州医科大学附属第一医院呼吸循环重点实验室	1	10	1.0	1.0
5	唐江锋	温州医科大学附属第一医院呼吸循环重点实验室	1	10	1.0	1.0