蜜蜂螺原体细胞骨架相关基因mreB的克隆表达及在螺原体二种形态时的表达差异

• 作者: 于汉寿 危蓉萍 周丹霞 康昕 纪燕玲 钱正宗
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 螺原体 细胞骨架 mreB基因 生物信息学 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 基因克隆及功能研究
• 页码范围: 1771-1778
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130743

摘要

[目的]在大肠杆菌中克隆表达蜜蜂螺原体细胞骨架相关基因mreB1-5,并预测所编码蛋白的理化性质,分析这些基因在螺原体螺旋状和非螺旋状时的表达水平,为进一步分析该基因的功能奠定基础.[方法]通过PCR扩增,从Spiroplasma melliferum CH-1基因组中获得mreB1-5基因,构建的重组表达载体pETmreBl-5分别在大肠杆菌BL21中诱导表达,利用镍亲和树脂纯化重组蛋白,通过在线工具预测MreB蛋白质的理化性质和功能域.利用Real-Time PCR比较螺原体CH-1在两种不同形态时mreB1-5基因的表达量.[结果]成功克隆到5个mreB基因,并在大肠杆菌BL21中高效表达.MreB蛋白分子量分别为36、23、23、37和25 kD,可能均为疏水性的蛋白,属于MreB/Mb1蛋白质家族.荧光定量PCR结果显示,螺原体在非螺旋状时mreB1-5基因的表达水平均远低于在螺旋状时基因的表达水平.[结论]本文第一次克隆表达了螺原体细胞骨架相关基因mreB1-5,初步表明这些基因在螺原体形态方面可能具有重要作用,为后续研究螺原体mre基因在其运动和形态方面的功能提供了重要信息.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	纪燕玲	南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点实验室	30	514	11.0	22.0
2	周丹霞	南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点实验室	2	2	1.0	1.0
3	危蓉萍	南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点实验室	1	1	1.0	1.0
4	康昕	南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点实验室	1	1	1.0	1.0
5	钱正宗	南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点实验室	1	1	1.0	1.0