温阳活血利水法对足细胞骨架及相关蛋白影响

• 作者: 孟祥燕 王相相 袁军 邱雯雯
• 来源期刊: 中西医结合心脑血管病杂志
• 关键词: 温阳活血利水方 肾小球疾病 足细胞 Dendrin 微丝 中间丝
• 年，卷（期）: 2018,（13）
• 页码范围: 856-860
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的: 观察温阳活血利水方含药血清对嘌呤霉素损伤小鼠永生系足细胞组织蛋白酶 L(cathepsinL, CatL)的转录因子 Dendrin、膜相关鸟苷酸激酶转化蛋白 2(membrane-associated guanylate kinase inverted2,MAGI-2)、下游底物 synaptopodin、RhoA mRNA与蛋白表达变化以及足细胞骨架蛋白 actin、中间丝分布情况的影响,探讨温阳活血利水方的作用改善肾病综合征蛋白尿及足突融合的机制.方法: 体外培养小鼠足细胞, 采用嘌呤霉素 45 mg /L、中药含药血清或地塞米松与足细胞孵育 12 h,荧光定量 PCR检测 CatL、synaptopodinmRNA表达变化; western blotting 测定 MAGI-2、synaptopodin、CatL、RhoA的蛋白表达; 细胞免疫荧光观察 Dendrin 的分布以及细胞骨架蛋白微丝和中间丝的荧光分布变化.结果: 嘌呤霉素作用足细胞 12 h 后,Dendrin 转核比例增多(与正常组对比 P＜0.01), MAGI-2、RhoA、synaptopodin 蛋白的表达显著性下降(与正常组对比,均 P＜0.01),CatL mRNA与蛋白的表达显著性升高(与正常组对比, 均 P＜0.01), synaptopodin mRNA表达没有变化(与模型组比较 P＞0.05),足细胞伪突回缩变短,中间丝和微丝结构紊乱,杂乱无章排列,结构不清晰.地塞米松、10％ 与 20％ 含药血清干预后 CatL mRNA与蛋白表达减少,MAGI-2、RhoA、synaptopodin 蛋白的表达有所增多, Dendrin 转核比例减少(与模型组对比,均 P＜0.01),均改善了足细胞骨架结构.结论: 温阳活血利水方能减少足细胞受损后 Dendrin 核内转移,降低胞质 catL水平,从而减少 synaptopodin 降解,使 RhoA表达增加,改善微丝(F-actin)和中间丝的重构, 稳定细胞骨架结构, 减少足突融合,从而减少蛋白尿.