EMA-PCR方法快速检测铜绿假单胞菌活菌研究

• 作者: 张宏斌 方梅 李建 王国庆 陆巧荣
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 铜绿假单胞菌 EMA-PCR 活菌检测
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1015-1018
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨将叠氮溴乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)选择渗透性与PCR技术相结合(EMA-PCR),建立有效快速检测铜绿假单胞菌活菌的方法.方法 以铜绿假单胞菌oprI基因为PCR检测靶基因,纯培养物提取模板进行PCR,检测PCR灵敏度、EMA使用浓度和曝光时间优化试验.结果 PCR检测灵敏度为3×103 CFU/mL;曝光处理时间为10 min; EMA浓度≤5μg/mL对活菌DNA扩增没有明显抑制,终浓度为1 μg/mL EMA能有效抑制3×106 CFU/mL死菌扩增;1％活菌混合体系检测结果阳性.结论 EMA-PCR方法能有效快速检测铜绿假单胞菌活菌,能避免PCR检测可能造成的假阳性结果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王国庆	四川大学华西公共卫生学院	49	443	10.0	19.0
2	李建		22	68	4.0	7.0