肠道病毒71型灭活疫苗热稳定性研究

• 作者: 刘龙丁 廖芸 张莹 李海巍 李琦涵 董承红
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 关键词: 肠道病毒A型,人 疫苗,灭活 温度 人二倍体细胞 热稳定性
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 726-730
• 页数: 5页
• 字数: 3738字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2014.08.015

摘要

目的 研究肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗(人二倍体细胞)生产过程中的中间产品及成品的热稳定性.方法 将不同批次EV71灭活疫苗的病毒收获液、疫苗原液以及疫苗成品分别置于不同温度保存.第0、6、12、24个月时选取存放于-20℃、4℃的病毒收获液及-20℃的疫苗原液的样品,第0、1、3、6、12个月时选取存放于4℃的疫苗原液的样品,第0、6、12、24个月时选取存放于4℃的疫苗成品的样品,第0、7、14、28、42、60天时选取存放于25℃的疫苗成品的样品,第0、3、7、14、21天时选取存放于37℃的疫苗成品的样品,检测样品的病毒感染性滴度(lgCCID50/ml;CCID50,cell culture infective dose 50％,细胞培养半数感染量)、抗原含量、内毒素含量、pH值等;对1 800只BLAB/c小鼠进行疫苗成品的腹腔免疫注射,同时针对每个温度下不同保存时间设立对照组,每组10只小鼠(注射无病毒抗原的稀释液),共150只.接种4周时每只小鼠采集尾静脉血500μl,检测血清的中和抗体效价,计算疫苗成品的半数有效量(ED50).采用随机区组方差分析,对不同温度下,不同保存时间的各项指标进行比较.结果 EV71灭活疫苗的病毒收获液在-20℃条件下,保存0、6、12、24个月时病毒滴度分别为(6.67 ±0.13)、(6.56±0.09)、(6.52±0.04)、(6.39±0.16) lgCCID50/ml;4℃条件下,各时间点的病毒滴度分别为(6.67 ±0.13)、(6.41±0.13)、(6.19 ±0.18)、(5.97±0.09) lgCCID50/ml,均随保存时间的延长呈下降趋势(F值分别为9.81和44.16,P值均＜0.05).疫苗原液在4℃条件下,保存0、1、3个月时的抗原含量均为(3 626.67±1 382.56) EU/ml,保存6和12个月时分别为(2 080.00±876.36)、(951.17±346.35) EU/ml.疫苗成品在4℃条件下,保存0、6、12、24个月时的效力分别为(31.00±2.71)、(32.93±3.22)、(39.37±3.44)、(46.04±3.25) EU/ml;在25℃条件下,保存0、7、14、28、42、60 d的ED50分别为(31.00±2.71)、(32.23±2.66)、(34.70±1.77)、(40.04±2.10)、(47.78±1.93)、(56.97±0.50) EU/ml;在37℃条件下,保存0、3、7、14、21 d的效力分别为(31.00±0.00) 、(36.20±0.00)、(41.87±0.50)、(53.25±0.50)、(64.84 ±0.58)EU/ml,ED50均随时间延长呈上升趋势,与初始值差异均有统计学意义(F值分别为28.49、215.15和156.12,P值均＜0.05).结论 在-20℃保存24个月或4℃保存6个月以内的EV71灭活疫苗病毒收获液,在-20℃保存24个月或4℃保存3个月以内的疫苗原液以及在4℃条件下保存24个月或25℃保存28 d或37℃保存7d以内的疫苗成品,其各项质量指标均具有较好的稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘龙丁	中国医学科学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室	21	49	5.0	6.0
2	李琦涵	中国医学科学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室	46	166	8.0	10.0
3	张莹	中国医学科学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室	20	20	2.0	3.0
4	廖芸	中国医学科学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室	4	10	2.0	3.0
5	李海巍	中国医学科学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室	1	2	1.0	1.0