香烟烟雾提取物对CD4+T细胞向Th17细胞和调节性T细胞分化的影响

• 作者: 刘莉丽 孙永昌 陈颖 韩俊燕
• 来源期刊: 国际呼吸杂志
• 关键词: 香烟烟雾提取物 Th17细胞 调节性T细胞 芳香烃受体 CD4+T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 519-525
• 页数: 7页
• 字数: 4494字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-436X.2014.07.010

摘要

目的：观察香烟烟雾提取物(CSE)对 CD4+ T 细胞向 Th17细胞和调节性 T 细胞分化的影响,为探索香烟烟雾暴露导致气道慢性炎症的机制提供实验依据。方法采用免疫磁珠法分离纯化健康志愿者外周血 CD4+ T 细胞,以1×106/ml 细胞密度接种于96孔培养板,分为以下8个组①空白对照组；②T 细胞刺激剂组：加入 T 细胞刺激剂抗人 CD3/28抗体微磁珠；③T 细胞刺激剂 CSE 干预组：CD3/28+2%CSE；④细胞因子组：CD3/28+细胞因子；⑤细胞因子 CSE 干预组：CD3/28+细胞因子+2%CSE；⑥芳香烃受体(AHR)激动剂6-甲酰基吲哚[3,2-b]咔唑(FICZ)组 CD3/28+细胞因子+FICZ；⑦AHR 拮抗剂白藜芦醇组：CD3/28+细胞因子+2%CSE+白藜芦醇；⑧溶剂对照组：CD3/28+细胞因子+DMSO。细胞因子为含 TGF-β/IL-1β/IL-6/IL-23的混合细胞因子,以诱导 Th17细胞和调节性 T 细胞分化。培养5 d 后,收集细胞,采用流式细胞术检测细胞表面分子 CD4+ CD25+ Foxp3+细胞(Treg 细胞),以及胞内细胞因子 IL-17+的 CD4+ T 细胞(Th17细胞),计算各种刺激培养条件下,诱导生成的Th17及 Treg 细胞占 CD4+ T 细胞的百分比。结果①CSE 对 Th17细胞分化的影响：空白对照组 Th17细胞比例为(0.69±0.12)%,加入 T 细胞刺激剂后为(1.32±0.12)%,在此基础上加入 CSE 的干预组IL-17+细胞比例升高为(2.17±0.24)%,(t =3.21,P <0.01)；细胞因 子 组 IL-17+细胞比例为(1.35±0.08)%,而在此基础上加入 CSE 的干预组 Th17细胞升高为(2.58±0.39)%(t =3.13,P <0.01)。②CSE 对 Treg 细胞分化的影响：在空白对照组中,Treg 细胞占 CD4+ T 细胞中的比例为(0.21±0.19)%,在加入 T 细胞刺激剂后,Treg 细胞比例升高(3.59±0.37)%,加入细胞因子后,Treg 细胞比例明显增加(5.85±0.76)%；在继续加入 CSE 干预后,Treg 细胞比例明显减少(3.07±0.33)%(t =3.74, P <0.01)；同样,T 细胞刺激剂 CSE 干预组也出现 Treg 细胞比例减少(2.19±0.19)%,(t =2.71,P <0.05)。③AHR 活化对 Treg 细胞和 Th17细胞分化的影响：AHR 激动剂 FICZ 组的 Treg 细胞比例明显低于细胞因 子 组 [(2.60±0.40)%,(5.85±0.76)%](t =4.18,P <0.01),但 Th17细胞比例升高[(2.86±0.43)%,(1.35±0.08)%](t =3.65,P <0.01)。AHR 阻断剂白藜芦醇组中的 Treg 细胞比例和 Th17细胞比例均低于细胞因 子 组,分别为[(0.33±0.14)%,(5.85±0.76)%],(t =7.71,P <0.01)和[(0.42±0.07)%,(1.35±0.08)%],(t =8.87,P <0.001),并且和空白对照组接近,在细胞培养第5天通过7-AAD-AnnexinV 对该组细胞检测并未发现细胞异常凋亡或死亡情况,结合该组细胞培养过程中的镜下形态推测该实验组 CD4+ T 细胞的分化增殖受到白藜芦醇抑制。结论 CSE 可促进CD4+ T 细胞向 Th17细胞分化,并抑制 Treg 细胞分化,这一过程可能通过 AHR 诱导。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈颖	首都医科大学附属北京同仁医院呼吸科	62	395	11.0	16.0
2	孙永昌	首都医科大学附属北京同仁医院呼吸科	96	545	14.0	19.0
3	韩俊燕	首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所	9	26	3.0	4.0
4	刘莉丽	首都医科大学附属北京同仁医院呼吸科	1	1	1.0	1.0