ILK siRNA对高糖刺激的人肾小管上皮细胞GSK-3β及β-catenin表达的影响

• 作者: 吴海江 姚芳 张丽萍 段惠军 郝军 闫喆
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糖尿病肾病 上皮-间充质转化 整合素连接激酶 小干扰RNA 糖原合成酶激酶3β β-连环蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 503-508
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 字数: 3932字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.03.020

摘要

目的:探讨高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中整合素连接激酶小干扰RNA(ILK siRNA)对糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)磷酸化和β-连环蛋白(β-catenin)核内表达的影响及意义.方法:体外培养人近端肾小管上皮细胞系HKC,分为正常对照组(NG)、高糖组(HG)、高糖+阴性转染对照组 (HG+HK)和高糖+ILK siRNA组(HG+ILK siRNA).倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达.RT-PCR及Western blotting检测ILK mRNA及蛋白表达水平;免疫细胞化学检测磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和β-catenin表达.Western blotting检测总GSK-3β、p-GSK-3β、核β-catenin、总β-catenin、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平.结果:(1)倒置荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,证实构建的siRNA重组质粒成功转染HKC细胞;(2)与HG和 HG+HK组相比,HG+ILK siRNA组ILK mRNA及蛋白水平下降,但较NG组表达仍高;(3)HG+ILK siRNA组ILK基因沉默后,p-GSK-3β与核β-catenin蛋白表达较HG及HG+HK组均下降,但较NG组表达仍高.而总GSK-3β与总β-catenin 在各组表达无明显差异.结论:ILK、GSK-3β和β-catenin可能参与了高糖介导的肾小管上皮细胞转分化过程.ILK可能通过调节Wnt/β-catenin途径下游效应蛋白GSK-3β和β-catenin的表达而促使肾小管上皮细胞转分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段惠军	河北医科大学病理教研室	133	1149	17.0	26.0
2	张丽萍	河北医科大学第二医院肾内科	47	172	8.0	10.0
3	郝军	河北医科大学病理教研室	64	271	9.0	12.0
4	姚芳	河北医科大学病理教研室	15	85	5.0	8.0
5	吴海江	河北医科大学病理教研室	21	130	7.0	10.0
6	闫喆	河北医科大学第二医院肾内科	31	160	8.0	11.0