miR-205靶定YES1对肺癌细胞A549的增殖抑制作用

• 作者: 刘志勇 崔和勤 熊亚南 甄永占 程远 邬鹏宇 郝晓方
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: miR-205 YES1 肺肿瘤 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 493-498
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2
• 字数: 3661字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20140306

摘要

目的：利用实时定量 RT-PCR技术和双荧光蛋白报告基因分析系统检测miR-205在肺癌组织及 A549细胞系中的表达水平以及其直接靶基因 YES1，探讨 miR-205抑制肺癌细胞 A549增殖的可能机制。方法：实时定量 RT-PCR技术检测10例肺癌组织和10例癌旁正常肺组织中 miR-205的表达水平；miR-205 mimics 和control mimics分别转染A549细胞，利用细胞计数和集落形成实验检测转染后A549细胞的增殖情况。选取表达绿色荧光蛋白的质粒 pcDNA3／EGFP，将 YES13′UTR的一段特异性序列、YES13′UTR（miR-205互补位点）点突变后的序列分别插入该质粒中，构建 YES1-3′UTR 和 mut-YES1-3′UTR 的绿色荧光表达质粒。实验分为YES1-3′UTR、YES1-3′UTR 与 miR-205 mimics、YES1-3′UTR 与 control mimics、mut-YES1-3′UTR、mut-YES1-3′UTR与 miR-205 mimics 和 mut-YES1-3′UTR 与 control mimics 共6组，均与表达红色荧光蛋白pDsRed2-N1共同转染肺癌细胞系 A549，荧光分光光度计进行蛋白定性和定量检测。结果：与癌旁正常肺组织比较，miR-205在肺癌组织及 A549细胞中表达水平降低（P＜0.05）；miR-205mimics 转染组 A549细胞增殖率明显低于转染 control mimics对照组（P＜0.05）；YES1-3′UTR与miR-205 mimics共转实验组荧光蛋白表达水平低于YES1-3′UTR与control mimics共转染组（P＜0.01）；YES1蛋白高表达组A549细胞细胞克隆形成数高于细胞对照组（P＜0.05）。结论：miR-205可能通过靶定靶基因 YES1抑制了肺癌细胞 A549的增殖，提示 miR-205和YES1有可能成为肿瘤生物治疗的新靶点。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	甄永占	河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	24	84	6.0	7.0
2	邬鹏宇	河北联合大学附属医院心胸外科	12	27	3.0	4.0
3	郝晓方	河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	3	12	2.0	3.0
4	熊亚南	河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	29	85	5.0	7.0
5	刘志勇	河北联合大学附属医院心胸外科	16	60	5.0	7.0
6	程远	河北联合大学附属医院心胸外科	1	2	1.0	1.0