5-氮杂-2'-脱氧胞苷对非小细胞肺癌体外生长及侵袭能力和TFPI-2基因mRNA表达的影响

• 作者: 张晓明 朱水波 梁江水 殷桂林 纪涛 董永强
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 非小细胞肺癌 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 组织因子途径抑制物2 甲基化
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 369-373
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2014.05.005

摘要

目的 探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2-deoxycytidine,5-Aza-CdR)干预对非小细胞肺癌(nonsmall cell non cancer,NSCLC)细胞株A549生长增殖及其组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)基因表达的影响,同时探讨5-Aza-CdR能否通过恢复TFPI-2基因表达抑制非小细胞肺癌A549细胞侵袭能力.方法 用不同浓度的5-Aza-CdR处理A549细胞株,MTT法检测药物处理24、48、72 h后的细胞增殖活性,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)法检测药物处理72 h后细胞周期分布,Real-time PCR技术检测药物处理72h后A549细胞TFPI-2基因mRNA的表达,Transwell小室法测定药物处理24h后A549细胞体外侵袭能力的变化.结果 MTT检测显示不同浓度5-Aza-CdR处理A549细胞24、48、72h后,细胞的生长受到抑制,且抑制作用呈明显的剂量和时间依赖性.FCM检测分析显示0、1、5、10 μM 5-Aza-CdR处理A549细胞72 h后,细胞增殖指数逐渐降低,分别为(30.43±0.99)％、(23.89±0.83)％、(16.19±0.34)％、(6.49±0.55)％(P＜0.05).Real-time PCR检测显示0、1、5、10 μM的5-Aza-CdR处理A549细胞72 h后,相对mRNA表达水平分别为(1±0)、(1.49±0.14)、(1.86±0.09)、(5.80±0.15) (P＜0.05),TFPI-2基因mRNA表达呈明显的上升趋势,且随着药物浓度增加而增加.Transwell小室法检测显示每一高倍镜下平均穿膜细胞数分别为(316.15±18.7)、(84.15±12.14)、(28.85±7.13)、(14.35±3.33),均明显低于对照细胞(P＜0.05).结论 5-Aza-CdR能通过降低TFPI-2基因的甲基化而恢复其在非小细胞肺癌细胞株A549细胞中的表达,并抑制A549细胞的增殖和侵袭.