近红外双荧光系统在磷酸酯酶筛选中的应用

• 作者: 张业 杨昕霆 沈珝琲 阎海霞
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 奥德赛近红外双荧光扫描系统 KDM3A 磷酸酯酶
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 52-54
• 页数: 3页
• 分类号: R393
• 字数: 2613字
• 语种: 中文

摘要

目的 应用奥德赛(Odyssey)近红外双荧光系统筛选去甲基化酶KDM3A去磷酸化的磷酸酯酶.方法 使用磷酸酯酶干扰质粒转染HEK293T细胞,使用磷酸化的KDM3A抗体对细胞进行杂交,近红外荧光染料DRAQ5标记细胞核,利用奥德赛(Odyssey)近红外双荧光系统对细胞进行荧光扫描,荧光强度的比值可代表细胞内相对KDM3A磷酸化水平,进而筛选出相关的磷酸酯酶.结果 磷酸酯酶广谱抑制剂冈崎酸OA处理转染后的细胞,近红外双荧光扫描系统可以检测到KDM3A的磷酸化,初步筛选出4个可能参与KDM3A去磷酸化的磷酸酯酶亚基.结论 近红外双荧光系统可以应用于磷酸酯酶的初步筛选.