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RNA干扰HIF-1α对食管鳞癌细胞Eca-109抑制效应的体内体外表达分析
RNA干扰HIF-1α对食管鳞癌细胞Eca-109抑制效应的体内体外表达分析
作者:
李苏宜
杭兆康
郭爱平
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
食管鳞癌
Eca-109细胞
抑制效应
HIF-1α
RNA干扰
体外及体内表达
摘要:
目的:探讨分析RNA干扰缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对食管鳞癌细胞Eca-109抑制效应的体外及体内的表达情况。方法选取研究用Eca-109细胞,设计RNA干扰片断h-EGFR构建重组质粒pGensil-1-EGFR转染目的基因片段。测定EGFR蛋白/mRNA表达,挑选转染成功的基因修饰细胞株分别植入裸鼠体内,构建移植瘤模型,且随机分为未转染组与实验组。运用免疫组化技术检测各组裸鼠HIF-1α蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测各组HIF-1αmRNA表达,最后测量裸鼠移植瘤的重量及体积。结果 Eca-109中HIF-1α蛋白伴随氯化钴浓度的升高而升高。并且HIF-1α蛋白水平在缺氧后12小时升高,24小时后降低,且持续减少。转染后EGFR mRNA的阳性表达率为26.55%、9.48%、4.60%,依次降低,P<0.01。其中EGFR siRNA水平最低。转染后EGFR mRNA阳性表达率为24.30%、34.11%、34.05%,与未转染组(78.27%)相比显著降低(P<0.01)。经RT-PCR分析,实验组裸鼠EIF-1αmRNA表达较少,与未转染组相比差异无显著性(P>0.05)。实验组裸鼠HIF-1α蛋白表达的灰度值显著低于未转染组(P<0.01)。接种1周后裸鼠均出现肿瘤,实验组裸鼠移植瘤体积为(0.20±0.13)cm3,重量为(0.21±0.05)g,均显著少于未转染组。结论 HIF-1α蛋白的表达与氯化钴浓度及缺氧有关,RNA干扰缺氧诱导的HIF-1α只发生在蛋白水平,而非基因水平, RNA干扰技术可以成功抑制食管鳞癌细胞HIF-1α基因,阻碍肿瘤细胞生长、增殖,降低肿瘤恶性程度,值得临床应用与推广。
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细胞系,肿瘤
RNA干扰
缺氧诱导因子1,α亚基
逆转录聚合酶链反应
印迹法,蛋白质
细胞增殖
小鼠,近交BALB C
内容分析
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引文网络
相关学者/机构
相关基金
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关键词热度
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文献信息
篇名
RNA干扰HIF-1α对食管鳞癌细胞Eca-109抑制效应的体内体外表达分析
来源期刊
中国医学前沿杂志(电子版)
学科
关键词
食管鳞癌
Eca-109细胞
抑制效应
HIF-1α
RNA干扰
体外及体内表达
年,卷(期)
2014,(9)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
23-26
页数
4页
分类号
字数
2923字
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
李苏宜
安徽省肿瘤医院肿瘤营养与代谢治疗科
23
82
5.0
7.0
2
杭兆康
南京市六合人民医院肿瘤内科
5
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3.0
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郭爱平
南京市六合人民医院肿瘤内科
1
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引证文献(0)
二级引证文献(0)
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节点文献
食管鳞癌
Eca-109细胞
抑制效应
HIF-1α
RNA干扰
体外及体内表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国医学前沿杂志(电子版)
主办单位:
人民卫生出版社
出版周期:
月刊
ISSN:
1674-7372
CN:
11-9298/R
开本:
16开
出版地:
北京市朝阳区潘家园南里19号人卫大厦B座306室
邮发代号:
82-136
创刊时间:
2008
语种:
chi
出版文献量(篇)
4003
总下载数(次)
10
总被引数(次)
24831
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