华支睾吸虫膜抗原/排泄分泌抗原酸性磷酸酶的克隆、表达、生物学特征分析及组织定位

• 作者: 余新炳 刘炜 张彤 胡坤华 郑明慧
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 华支睾吸虫 酸性磷酸酶 排泄分泌抗原 膜抗原
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2059-2065
• 页数: 7页
• 分类号: R383.2+2
• 字数: 4010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.11.024

摘要

目的:对华支睾吸虫(Clonorchis sinensis,Cs)成虫酸性磷酸酶(acid phosphatase,AP)进行克隆、表达、生物学特征分析、组织定位及膜抗原/排泄分泌抗原鉴定.方法:对CsAP进行生物信息学、分子生物学、免疫组化及明胶酶谱分析.结果:从Cs cDNA文库中筛选出编码AP新基因,全长1 410 bp,重组并由大肠杆菌表达、纯化,得到分子量为55 kD的重组蛋白GsAP.Western blotting分析表明,CsAP既是膜抗原又是分泌排泄抗原;免疫组化显示,CsAP荧光显示于成虫的表皮层和肠支,在囊蚴也有显示,在雷蚴和尾蚴未显示荧光;ELISA分析表明sAP识别华支睾吸虫病人和日本血吸虫病人存在吸虫间的交叉免疫反应,CsAP及粗抗原识别轻、中、重度感染程度华支睾吸虫病人的差别不明显.重组蛋白免疫大鼠后,总IgG抗体滴度于3周达较高峰,抗体效价大于1∶25 600.明胶降解实验表明:CsAP具降解胶原能力.结论:上述结果表明,CsAP在大肠杆菌中高效表达,具有较好的免疫原性,但血清诊断价值不理想;CsAP可能既是膜抗原,又是排泄分泌抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学中山医学院热带病防治重点实验室病原生物学教研室	201	1352	17.0	28.0
2	刘炜	中山大学第三附属医院广东省肝病重点实验室	24	154	7.0	11.0
3	张彤	中山大学第三附属医院广东省肝病重点实验室	44	201	7.0	11.0
4	胡坤华	中山大学中山医学院药理学教研室	8	14	3.0	3.0
5	郑明慧	中山大学孙逸仙纪念医院检验科	7	12	3.0	3.0