硫代磷酸酯类杀虫剂ScFv抗体库的构建与初步筛选

• 作者: 刘爽 寇立泉 王东方 祁志军
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 硫代磷酸酯类杀虫剂 单链抗体库 ELISA
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 202-206
• 页数: 5页
• 分类号: S481
• 字数: 4136字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1004-1389.2014.04.033

摘要

旨在构建硫代磷酸酯类杀虫剂单链抗体(ScFv)库,并对其进行初步筛选.采用RT-PCR法从牛血清蛋白(BSA)人工抗原免疫的Balb/C小鼠脾细胞中克隆出VH和VL基因,通过重叠延伸PCR方法将VH和VL基因拼接在一起,构建ScFv基因,与表达载体pCANTAB 5E连接后,在大肠杆菌中诱导表达.采用亲和富集法,经6轮淘筛后用酶联免疫吸附分析(ELISA)测定其活性.得到滴度为2.2×106 pfu/mL噬菌体库,ELISA检测呈阳性.说明成功表达并筛选得到鼠源抗硫代磷酸酯类杀虫剂ScFv抗体库.