Ag85B慢病毒抑制人支气管上皮细胞TSLP及其受体的表达

• 作者: 吴健 孟锦绣 房祥峰 李东风 钱江
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胸腺基质淋巴细胞生成素 胸腺基质淋巴细胞生成素受体 慢病毒载体 抗原85B 人支气管上皮细胞
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2015-2020
• 页数: 6页
• 分类号: R363|R562.2+5
• 字数: 4550字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.11.016

摘要

目的:研究结核分枝杆菌抗原85B(Ag85B)慢病毒对正常人支气管上皮细胞(NHBEC)表达胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)和其受体TSLPR的影响,探究Ag85B抑制哮喘气道炎症的机制.方法:将Ag85B基因重组质粒转入293T细胞,构建携带Ag85B和EGFP报告基因的慢病毒载体pLVX-IRES-Neo-EGFP-Ag85B(Ag85B慢病毒).用鉴定后的Ag85B慢病毒感染HEK293细胞,计算滴度并观察感染效率.利用Lipofectamine(R) 2000使Ag85B慢病毒感染体外培养NHBEC,设立空病毒感染和空白对照组.Real-time PCR和Western blotting检测Ag85B、TSLP和TSLPR mRNA和蛋白表达水平.结果:成功构建Ag85B慢病毒感染NHBEC体系,Ag85B慢病毒感染NHBEC 48 h后,荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白表达,细胞生长状态良好,病毒滴度为2×10H TU/L,感染效率达到90％以上.Real-time PCR和Western blotting结果显示Ag85B慢病毒成功感染NH-BEC,可见相应Ag85B mRNA和蛋白表达.与空病毒感染和空白对照组比较,Ag85B慢病毒感染组TSLP mRNA表达有下降趋势,TSLPR mRNA与TSLP和TSLPR的蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05).结论:Ag85B慢病毒感染NHBEC可以抑制NHBEC的TSLP和TSLPR的表达,提示Ag85B可能通过靶向阻滞TSLP-TSLPR途径抑制哮喘气道炎症.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴健	广东省人民医院广东省医学科学院呼吸内科	12	39	3.0	5.0
2	李东风	广东省人民医院广东省医学科学院医学研究中心	41	234	7.0	13.0
3	钱江	南方医科大学研究生学院	9	104	4.0	9.0
5	孟锦绣	广东省人民医院广东省医学科学院医学研究中心	8	36	4.0	5.0
6	房祥峰	南方医科大学研究生学院	2	3	1.0	1.0