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摘要:
目的:研究RNA干扰(RNA interference.RNAi)对肾癌细胞多药耐药基因(MDR1)表达的抑制作用,并分析干扰前后肾癌细胞对替尼泊苷(VM-26)敏感性的变化.方法:根据MDR1基因设计3条小干扰RNA(small interfering RNA.siRNA)序列,在质粒的介导下转染肾癌A498细胞,RT-PCR法分析转染前后MDR1 mRNA表达水平,筛选出干扰效率最高的siRNA序列;进而利用慢病毒包装siR-NA重组质粒,感染A498细胞,RT-PCR法筛选沉默效果最好的细胞株进行克隆,Western bolt法检测MDR1蛋白表达水平,MTT法对比干扰前后替尼泊苷对细胞半抑制浓度(IC50)的变化.结果:3条siRNA序列均能不同程度地抑制细胞MDR1基因的表达,其中siRNA-1序列能更有效地封闭MDR1基因,使MDR1 mRNA表达水平下降67%;筛选出的稳转细胞株与未干扰细胞袜相比,MDR1蛋白表达量明显下降,并使替尼泊苷对细胞的IC50降低约79.8%,差异具有统计学意义(P<0.01).结论:RNAi可抑制肾癌A498细胞MDR1基因的表达从而逆转其对替尼泊苷的耐药,使肾癌细胞化疗耐药逆转成为可能.
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文献信息
篇名 RNAi逆转肾癌细胞MDR1基因表达导致的替尼泊苷耐药
来源期刊 海南医学院学报 学科 医学
关键词 RNA干扰 小干扰RNA 多药耐药基因 替尼泊苷
年,卷(期) 2014,(2) 所属期刊栏目 基础医学
研究方向 页码范围 149-153
页数 5页 分类号 R737.11
字数 3322字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 沈茜 第二军医大学附属长海医院实验诊断科 184 1189 17.0 25.0
2 朱建华 解放军总医院第一附属医院肿瘤一科 49 238 9.0 13.0
3 肖文华 解放军总医院第一附属医院肿瘤一科 58 274 9.0 15.0
4 郝怡鑫 解放军总医院第一附属医院肿瘤一科 12 26 3.0 4.0
5 李秋文 解放军总医院第一附属医院肿瘤一科 21 127 5.0 11.0
6 贺铮雯 第二军医大学附属长海医院实验诊断科 5 48 3.0 5.0
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海南医学院学报
半月刊
1007-1237
46-1049/R
大16开
海南省海口市学院路3号
84-14
1995
chi
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