NGFβ/HIF-1α双重转染的骨髓间充质干细胞对神经元轴突再生的作用

• 作者: 吕刚 庄培袁 张玉强 李永明 范仲凯 贾志强
• 来源期刊: 解放军医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 神经营养因子β 低氧诱导因子-1α 基因转染 轴突再生
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1141-1146
• 页数: 6页
• 分类号: R338.1
• 字数: 4870字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2014.11.017

摘要

目的 观察神经生长因子β (nerve growth factor β,NGF β)/低氧诱导因子-1 d(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)双重转染的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对神经元轴突再生微环境的改善作用,为完善微环境中轴突再生的理论提供资料.方法 分别构建携带编码NGFβ、HIF-1α的慢病毒载体,用最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)转染BMSCs后,Western blot检测转染后的BMSCs表达NGF β、HIF-1α的情况.培养SD大鼠皮质神经元并将其与转染后的BMSCs用Transwell双层培养板构建共培养体系.将共培养体系在厌氧培养罐中培养48 h后,用ELISA方法检测神经元培养上清液中NGF β、HIF-1α、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平,并用Image pro-Plus软件测量神经元轴突的长度.实验分组:A组:单独培养神经元;B组:BMSCs与神经元共培养;C组:NGF β转染的BMSCs与神经元共培养;D组:HIF-1 α转染的BMSCs与神经元共培养;E组:NGFβ/HIF-1α双重转染的BMSCs与神经元共培养.结果 Le-RFP-NGFβ和Le-GFP-HIF-1 α基因转染BMSCs转染率分别为84.83％和89.63％.Western blot检测显示,转染后的BMSCs能表达目的蛋白NGFβ和HIF-1α.共培养体系ELISA检测结果显示,C组和E组的NGFβ的表达量明显高于A、B组(P＜0.05);D组和E组的HIF-1α的表达量明显高于A、B组(P＜0.05).D、E两组的VEGF表达量高于A、B两组(P＜0.05).Image pro-Plus测量神经元轴突长度结果显示,C、D、E组大于A、B两组(P＜0.05),E组大于C、D组(P＜0.05).结论 与NGF β/HIF-1α双重转染BMSCs共培养的神经元轴突生长情况良好,在共培养环境中对神经元存活发挥重要作用的NGFβ、HIF-1α、VEGF等因子高表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕刚		70	279	9.0	11.0
2	李永明		4	5	2.0	2.0
3	贾志强		7	16	3.0	3.0
4	范仲凯		23	90	5.0	7.0
5	庄培袁		2	3	1.0	1.0
6	张玉强		5	20	3.0	4.0