高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因真核表达载体的构建及表达

• 作者: 叶奕优 吕建强 唐金明 孙洁 廖立珊 张彩虹 曹琛福 曾少灵 杨俊兴 林庆燕 秦智锋 花群义 阮周曦
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 N基因 杆状病毒 表达
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 25-28
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3170字
• 语种: 中文

摘要

为进一步研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）N 蛋白的结构、功能及免疫学特性，提取 PRRSV 云南分离株 A06 RNA，设计特异性引物扩增全长 N 基因，得到长度为372 bp 的目的片段，克隆至杆状病毒 Bac-To-Bac 表达载体 pFastBac HTB 中，转化大肠埃希菌 DH10Bac 进行同源重组，成功构建了含有 N 基因的真核表达载体，转染 Sf9细胞，回收得到重组杆状病毒。SDS-PAGE 和 Western blot 检测结果表明，表达产物17 ku，与预期大小一致，能与 PRRSV 阳性血清产生特异性反应。