烟草青枯病菌巢式PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 刘裴清 李本金 翁启勇 谢世勇 谢廷鑫 陈庆河
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草 青枯病菌 巢式PCR 分子检测
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 2230-2235
• 页数: 6页
• 分类号: S435.72
• 字数: 4016字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2014.11.022

摘要

利用细菌16S-23S rDNA内源转录间隔区通用引物L1/L2扩增烟草青枯病菌基因组DNA,并对其扩增产物进行克隆测序,经与近缘种序列多重比对分析后,设计1对特异性引物RsF/RsR,用于包括烟草青枯病菌在内的15种不同细菌、5种真菌、3种卵菌基因组DNA的PCR扩增.结果表明:在优化的反应体系与程序条件下,该对引物只能从烟草青枯病菌中扩增出241 bp的特异片段,并通过序列测定验证了其准确性;将引物RsF/RsR与细菌通用引物L1/L2进行巢式PCR扩增后,其检测灵敏度在DNA水平上可达0.4 fg/μL,较常规PCR提高1 000倍,表明该对引物能有效地用于烟草组织及土壤中青枯病菌的检测.此结果对烟草青枯病的早期诊断、快速检测及病害流行学研究具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢世勇	福建省农业科学院植物保护研究所	22	297	9.0	17.0
2	翁启勇	福建省农业科学院植物保护研究所	90	1358	23.0	33.0
3	陈庆河	福建省农业科学院植物保护研究所	58	793	16.0	25.0
4	李本金	福建省农业科学院植物保护研究所	52	476	13.0	19.0
5	刘裴清	福建省农业科学院植物保护研究所	8	43	4.0	6.0
6	谢廷鑫		4	36	3.0	4.0