Peroxiredoxin 2基因慢病毒载体的构建及对结直肠癌SW480细胞增殖的影响

• 作者: 傅仲学 冯继红 卢伟东 吴星烨 张寿儒 文坤明 王昊
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结直肠癌 SW480 过氧化还原蛋白酶2 慢病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1078-1082
• 页数: 5页
• 分类号: R735.2
• 字数: 4519字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2014.08.016

摘要

目的：构建Peroxiredoxin 2（Prdx2）基因慢病毒表达载体，建立能够稳定高表达Prdx2的结直肠癌SW480细胞株，研究Prdx2的高表达对SW480细胞生长增殖的影响。方法：利用PCR扩增Prdx2编码区片段，克隆插入载体Ubi-MCS-EGFP-IRES-Puromycin （GV218）中，构建Ubi-Prdx2-EGFP-Puromycin（LV-Prdx2）慢病毒表达载体，包装产生慢病毒颗粒，鉴定后将其转染SW480细胞，荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白表达；应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（ qRT-PCR ）和Western blot方法检测SW480细胞中Prdx2的mRNA和蛋白水平表达情况；MTT法检测细胞生长情况；平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。结果：构建的重组慢病毒表达载体Ubi-Prdx2-EGFP-Puromycin（LV-Prdx2）经鉴定正确；慢病毒转染SW480细胞后，细胞中Prdx2在mRNA和蛋白水平高表达。 MTT法及平板克隆形成实验结果显示Prdx2高表达的SW480细胞增殖能力显著增强（P＜0.05）。结论：成功构建Prdx2基因慢病毒表达载体Ubi-Prdx2-EGFP-Puromycin，筛选出稳定高表达Prdx2的SW480细胞株；高表达的Prdx2分子可显著促进结直肠癌SW480细胞增殖。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	文坤明	遵义医学院附属医院普外科	34	121	7.0	10.0
2	傅仲学	重庆医科大学附属第一医院胃肠外科	113	519	12.0	17.0
3	吴星烨	重庆医科大学附属第一医院胃肠外科	20	53	5.0	6.0
4	冯继红	重庆医科大学附属第一医院胃肠外科	5	18	2.0	4.0
5	张寿儒	重庆医科大学附属第一医院胃肠外科	3	0	0.0	0.0
6	卢伟东	重庆医科大学附属第一医院胃肠外科	5	55	2.0	5.0
7	王昊	重庆医科大学附属第一医院胃肠外科	4	0	0.0	0.0