Beclin1表达抑制SKOV3/DDP细胞增殖机制探讨

• 作者: 刘佳华 孙阳 晋龙 眭玉霞 赖力
• 来源期刊: 中华肿瘤防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Beclin1 增殖 血管生成素 Tie-2受体 SKOV3/DDP
• 年，卷（期）: 2014,（17）
• 所属期刊栏目: 实验研究/论著
• 页码范围: 1329-1333
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨自噬基因Beclin1通过影响血管生成素的表达对SKOV3/DDP细胞增殖抑制的可能机制.方法:脂质体包裹重组构建pcDNA3.1-Beclin1和pSUPER-Beclin1质粒后,分别体外转染SKOV3/DDP细胞,并筛选稳定表达株,通过实时荧光定量RT-PCR检测不同细胞株中Beclin1、Ang-1、Ang-2及Tie-2受体mRNA表达,蛋白质印迹法检测Beclin1、Ang-1、Ang-2及Tie-2蛋白水平变化,MTT法测定细胞生长增殖情况.结果:pcDNA3.1-Bec组Beclin1 mRNA定量为31.39±3.16,明显高于未转染对照组的1.03±0.08,P＜0.001;而pSUPER-Bec组为0.29±0.05,较对照组明显降低,P=0.003.pcDNA3.1-Bec组Ang-1 mRNA定量为6.13±0.29,明显低于对照组的9.28±0.53,P=0.023.pSUPER-Bec组Ang-2 mRNA定量为7.33±0.35,较对照组的11.36±0.59明显降低,P=0.021.pSUPER-Bec组Tie2 mRNA定量为7.96±0.38,与空白对照组的13.23±0.61相比亦明显降低,P=0.018.MTT法检测结果提示,pcDNA3.1-Bec组转染48 h吸光度值为1.13±0.06,72 h为1.21±0.05,96 h为1.39±0.06;与未转染对照组的1.24±0.05、1.49±0.05及1.93±0.06比较,细胞增殖均明显减慢,F值分别为11.136、20.827和41.633,P值分别为0.029、0.011和0.005.pSUPER-Bec组转染48 h为1.52±0.06,72 h为1.88±0.06,96 h为2.16±0.08,与对照组比较,细胞增殖均明显增快,F值分别为18.976、33.819和15.265,P值分别为0.012、0.007和0.016.结论:Beclin1过度表达能抑制SKOV3/DDP细胞增殖,其机制可能与Ang及其Tie-2受体的异常表达和平衡失调有关.