慢病毒载体介导的CXCR7-shRNA联合重楼总皂苷对胃癌细胞SGC7901特异性靶向干预的实验研究

• 作者: 李谌 王海龙 赵东文 陆航
• 来源期刊: 中国生化药物杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 CXCR 7 CXCL 12 慢病毒载体 shRNA
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 分类号: R735.2
• 字数: 4481字
• 语种: 中文

摘要

目的：探讨慢病毒介导的CXCR 7-shRNA转染人胃癌细胞株SGC 7901后重楼总皂苷干预对CXCR7蛋白表达的影响。方法设计并合成CXCR7的3条shRNA序列及1条阴性对照序列，与pSilencerTM 4.1系统合成构建重组慢病毒载体，转染HEK 293 T细胞包装病毒并检测滴度；将3种重组慢病毒载体及阴性对照分别感染人胃癌细胞SGC 7901，RT-PCR检测用药前后CXCR 7 mRNA的表达情况，测定沉默效率，筛选沉默效率最高的一组CXCR 7-shRNA作为后续实验表达载体；MTT法检测转染CXCR 7-shRNA对SGC 7901细胞的增殖的影响以及重楼总皂苷干预后的影响；Western blot检测转染CXCR 7-shRNA后SGC 7901细胞蛋白表达情况以及重楼总皂苷干预的影响。结果测序证实3种慢病毒载体及1组阴性对照载体均包装成功，滴度分别4.9×108 pfu/mL、3.6×108 pfu/mL、5.2×108 pfu/mL和2.0×108 pfu/mL；3组慢病毒载体转染SGC 7901细胞后，CXCR 7 mRNA的表达量均较阴性对照组显著降低（P＜0.05），其中CXCR 7-shRNA-1组和重楼总皂苷组对CXCR7的抑制率显著高于其他2组（P＜0.05）；CXCR 7-shRNA-1转染SGC 7901后，肿瘤细胞的生长增殖显著下降，与其他组相比有显著性差异（P＜0.05）；CXCR 7-shRNA-1转染SGC 7901后，与空病毒载体组、空白组相比，CXCR 7蛋白表达量显著降低（P＜0.05）。结论成功构建了3种CXCR 7-shRNA慢病毒表达载体。转染SGC 7901细胞以及采用重楼总皂苷处理均可有效下调CXCR 7 mRNA和蛋白的表达水平，并能够抑制肿瘤细胞的增殖与侵袭。因此可认为CXCR7基因在该机制中起到了至关重要的作用，为我们进一步研究以CXCR 7/CXCL 12生物学轴为靶点的胃癌基因治疗奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李谌	辽宁医学院附属第一医院普外科	22	51	4.0	6.0
2	陆航	辽宁医学院附属第一医院普外科	11	41	4.0	5.0
3	王海龙	辽宁医学院附属第一医院普外科	3	32	3.0	3.0