多重PCR在快速检测常见假丝酵母菌中的应用

• 作者: 卢金星 吴媛 李文革 车洁 边富宁 陈霞
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多重引物聚合酶链式反应 假丝酵母菌 快速检测
• 年，卷（期）: 2014,（22）
• 所属期刊栏目: 微生物检测方法
• 页码范围: 3247-3250
• 页数: 4页
• 分类号: R379.9
• 语种: 中文

摘要

目的 建立临床常见感染假丝酵母菌多重PCR快速检测法.方法 根据假丝酵母菌rDNA序列,设计光滑假丝酵母、白念假丝酵母和近平滑假丝酵母的种特异性引物,并应用真菌通用引物ITS1和ITS4,以白念假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、克柔假丝酵母、近平滑和季也蒙假丝酵母共6种菌的DNA为模板,进行多重PCR,2％琼脂糖凝胶电泳检测结果.大肠杆菌,金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌为阴性对照.同-PCR反应均重复2次.实验室保存的77株假丝酵母菌(25株白念假丝酵母,15株光滑假丝酵母,15株热带假丝酵母,8株克柔假丝酵母,8株近平滑假丝酵母,6株季也蒙假丝酵母)检测其重复性和稳定性.结果 得到3条种特异性引物,扩增出种特异性条带和ITS区域片段.重复2次均得出同样大小的产物片段.阴性对照均未扩增出条带.结论 该方法能快速准确检测6种常见感染的假丝酵母菌,具有高特异性.与传统培养方法相比,提高了非白假丝酵母鉴定的准确性,缩短了检测时间,具有一定的临床应用价值.