LAMP技术用于志贺菌的检测

• 作者: 凌霄 张如胜 谢文熙 邵筱 郭震 陈传 魏泉德
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 环介导恒等温扩增技术 PCR 痢疾志贺菌 检测体系
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 888-890,893
• 分类号: R115
• 语种: 中文

摘要

目的 依据环介导的恒等温扩增技术,建立一种新型的快速、准确、简单并方便检测食物中志贺菌的方法,为全面防治志贺菌导致的食物中毒提供依据.方法 本实验针志贺菌侵袭性质粒抗原ipaH基因的6个区域设计6条引物,利用链置换DNA聚合酶,在65℃左右的条件下反应60 min,短时间内快速完成核酸的扩增.反应结束后依据扩增副产物产生的焦磷酸镁沉淀的浊度,或使用SYBR Green Ⅰ颜色反应,判断ipaH是否为阳性,同时通过,琼脂糖凝胶电泳检测判断扩增产物的大小.结果 13例标准菌中,只有痢疾志贺菌LAMP产物呈混浊,加入SYBR Green Ⅰ显绿色且琼脂糖凝胶电泳有梯状亮带；痢疾志贺菌稀释106倍(约5 CFU/ml)之后仍然可以被LAMP检出而普通PCR检测不到.结论 LAMP技术可以快速、准确、特异性的检出志贺菌且方法简单、方便、灵敏度高于PCR,适合于室外现场使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭震	广东医学院病原生物学实验室	22	107	6.0	9.0
2	谢文熙	广东医学院病原生物学实验室	5	16	3.0	3.0
3	魏泉德	珠海市疾病预防控制中心微生物检验科	26	150	8.0	11.0
4	陈传	广东医学院病原生物学实验室	8	24	3.0	4.0
5	凌霄	广东医学院第二附属医院	2	14	2.0	2.0
6	邵筱	广东医学院病原生物学实验室	11	31	3.0	5.0
7	张如胜	珠海市疾病预防控制中心微生物检验科	3	47	3.0	3.0