重组人IL-4的克隆、表达和鉴定

• 作者: 叶迎春 年四季 王栩 袁青 邬于川 高燕
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: 人白细胞介素4 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2014,（15）
• 所属期刊栏目: 论著?基础研究
• 页码范围: 1881-1883
• 页数: 3页
• 字数: 3401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2014.15.020

摘要

目的：构建人IL‐4重组表达载体，表达纯化并鉴定人IL‐4重组蛋白。方法采用巢式PCR技术从健康志愿者外周血单核细胞（PBMC）总RNA中扩增人IL‐4开放阅读框基因，将扩增的IL‐4目的基因与表达质粒pET101/D‐TOPO连接，转化大肠杆菌BL21，进行表达纯化和鉴定。结果采用巢式PCR扩增得到IL‐4开放阅读框大小为460 bp ，测序比对显示序列正确。转化BL21后，通过对不同克隆子表达水平的筛选，筛选到高表达 IL‐4的克隆子，表达和纯化后聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS‐PAGE）显示，其融合蛋白大小约为28×103，与目的蛋白大小一致。Western blot鉴定结果显示表达的蛋白正确，为人IL‐4目的蛋白。结论成功表达纯化到人IL‐4重组蛋白。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高燕	泸州医学院基础医学院	26	137	5.0	11.0
2	邬于川	泸州医学院基础医学院	28	225	7.0	14.0
3	王栩	泸州医学院基础医学院	24	107	4.0	10.0
4	叶迎春	泸州医学院基础医学院	25	114	6.0	9.0
5	年四季	泸州医学院基础医学院	12	50	4.0	6.0
6	袁青	泸州医学院基础医学院	15	54	5.0	6.0