耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白的低温诱导表达纯化及免疫原性的鉴定

• 作者: 朱祖怀 邹玉涵 郑佐娅 金姝 闫佩毅 黄德魁
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: 葡萄球菌,金黄色 青霉素结合蛋白质类 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 基础实验研究论著
• 页码范围: 6-8
• 页数: 3页
• 字数: 3537字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2014.01.003

摘要

目的 探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) PBP2a的原核表达及其免疫源性的鉴定.方法 根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,将mecA基因的70～2 006 bp克隆至pET28a载体,转化E.coliBL21(DE3);经IPTG低温诱导表达后,利用镍琼脂糖凝胶亲和层析技术纯化目的蛋白;用抗PBP2a抗体鉴定纯化蛋白的免疫源性.结果 成功构建了不合跨膜区的PBP2a原核表达载体,在低温诱导条件下获取的蛋白纯化后无杂蛋白;该蛋白能与商品化抗PBP2a单克隆抗体结合.结论 利用分子克隆技术,获得了高纯度的不合跨膜区的PBP2a蛋白,且该蛋白具有免疫源性,为进一步制备抗PBP2a单克隆抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄德魁	上海市普陀区人民医院心内科	8	14	3.0	3.0
2	郑佐娅	上海交通大学医学院医学检验实验室	10	36	5.0	5.0
3	金姝	上海市普陀区人民医院检验科	14	72	4.0	8.0
4	邹玉涵	上海市普陀区人民医院检验科	10	31	3.0	5.0
5	闫佩毅	上海市普陀区人民医院检验科	11	27	3.0	4.0
6	朱祖怀	上海市普陀区人民医院检验科	3	4	1.0	2.0