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摘要:
目的:构建EB病毒基因LMP2A及BZLF1的融合基因(Z2A)重组腺病毒表达载体,探讨Z2A融合蛋白对EBV+细胞凋亡的作用.方法:利用AdEasy系统构建重组腺病毒载体pAd-Z2A,而后将之转染293细胞(人胚肾细胞)产生重组腺病毒rAd-Z2A.后者用于感染EBV阳性及阴性细胞,RT-PCR、Westem-blotting检测Z2A的mRNA和蛋白表达,以及流式细胞术检测其对EBV阳性细胞凋亡的调控.结果:序列测定和酶切实验均证实,Z2A融合基因正确插入穿梭质粒,并成功获得重组腺病毒表达载体pAd-Z2A及重组腺病毒rAd-Z2A.感染rAd-Z2A的NEC靶细胞检测到Z2A的表达.流式细胞术检测发现,与EBV-细胞组及EBV+空白质粒转染组相比,接种rA1-z2A的EBV+细胞组48h(P<0.05)凋亡细胞显著增多,72h时细胞近乎全部凋亡(P<0.01).结论:重组腺病毒rAd-Z2A可有效感染EBV+及EBV-细胞,从而显著促进EBV+细胞凋亡而不影响EBV-细胞,为进一步特异性靶向EBV+肿瘤的基因治疗奠定基础.
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文献信息
篇名 EBV融合基因Z2A腺病毒的制备及其在诱导EBV阳性细胞凋亡的应用
来源期刊 现代生物医学进展 学科 生物学
关键词 LMP2A BZLF1 融合基因 腺病毒载体 EBV
年,卷(期) 2014,(13) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 2426-2429
页数 分类号 Q75|Q78
字数 语种 中文
DOI 10.13241/j.cnki.pmb.2014.13.007
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 罗兵 青岛大学医学院微生物教研室 216 931 14.0 19.0
2 王云 青岛大学医学院微生物教研室 74 250 9.0 13.0
3 赵毅 广东医学院微免教研室 24 110 5.0 9.0
4 姚运红 广东医学院病理教研室 88 314 9.0 11.0
5 胡新荣 广东医学院肿瘤研究所 64 205 8.0 9.0
6 康海仙 广东医学院肿瘤研究所 11 30 3.0 5.0
7 王森 广东医学院肿瘤研究所 21 41 4.0 5.0
8 丁伟斌 广东医学院肿瘤研究所 3 22 2.0 3.0
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BZLF1
融合基因
腺病毒载体
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现代生物医学进展
旬刊
1673-6273
23-1544/R
16开
黑龙江省哈尔滨市和兴路32号
14-12
2001
chi
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