猪链球菌2型毒力因子gapdh基因的克隆·表达及与Hela细胞互作蛋白的筛选

• 作者: 刘泽文 周丹娜 杨克礼 段正赢 袁芳艳 谭臣 贝为成 郭锐 雷丽
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 2型猪链球菌 GAPDH 原核表达 多抗制备 受体
• 年，卷（期）: 2014,（36）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 12821-12824
• 页数: 4页
• 分类号: S852.6
• 字数: 4504字
• 语种: 中文

摘要

[目的]克隆并在大肠杆菌中表达猪链球菌2型毒力因子gapdh基因,寻找与GAPDH互作的受体蛋白.[方法]扩增猪链球菌2型甘油醛-3-磷酸脱氢酶gapdh基因并构建表达质粒pET28a-gapdh.[结果]在大肠杆菌BL21 (DE3)中成功表达了约41 kDa的融合蛋白GAPDH.Western blot试验说明GAPDH具有良好的免疫学活性.利用新西兰大白兔制备抗GAPDH蛋白的多克隆抗体.运用配体重叠技术,在HeLa细胞中初步找到了一个与GAPDH蛋白作用的潜在受体蛋白.[结论]为进一步研究猪链球菌2型的分子致病机理奠定基础.