胱天蛋白酶募集域蛋白9在急性胰腺炎发病早期的作用机制

• 作者: 娄晓丽 孟潇潇 徐萍 杨志文 王静 翁成钊
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 关键词: CARD9 外周血单核细胞 急性胰腺炎 NF-κB MAPK
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 624-629
• 页数: 6页
• 字数: 5322字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1432.2015.09.013

摘要

目的研究胱天蛋白酶募集域蛋白9（CARD9）在急性胰腺炎（AP）发病早期阶段的作用及其机制。方法收集49例 AP 患者[其中33例为轻症急性胰腺炎（MAP）患者，16例为重症急性胰腺炎（SAP）患者]入院后第1，第3和第5天的外周血单核细胞（PBMC）；对照组为20名健康志愿者。采用 Western 印迹检测 AP 患者 PBMC 中 CARD9、B‐cell lymphoma（Bcl）‐10表达水平及 p65 NF‐κB 和p38 MAPK 的磷酸化水平。免疫共沉淀方法和免疫荧光细胞化学分析检测对照组、SAP 和 MAP 入院第1天 PBMC 中 CARD9与 Bcl‐10共定位、表达及结合情况。采用单因素方差分析、Mann‐Whitney 检验比较组间数据。 Pearson 方法进行相关性分析。结果 Western 印迹结果显示，入院第1、第3、第5天时，SAP 组患者 PBMC 中 CARD9、Bcl‐10的表达（1．12±0．05、1．03±0．03、1．01±0．01和1．74±0．08、1．72±0．10、1．69±0．11）均明显高于对照组（0．33±0．10和1．02±0．11）和 MAP 组（分别为0．71±0．02、0．55±0．06、0．25±0．07 和1．15±0．03、1．09±0．07、1．01±0．04），差异均有统计学意义（F ＝35．76，18．20，P均＜0．01）。入院第1、第3天 SAP 组患者 PBMC 中 p38 MAPK 磷酸化水平（1．88±0．08、1．68±0．11）显著高于对照组（0．58±0．24）和第1、第3、第5天的 MAP 患者（0．86±0．08、0．77±0．10、0．73±0．20，F＝7．24，P均＜0．01）。入院第1、第3天 SAP 组患者 PBMC 中 p65 NF‐κB 磷酸化水平（1．64±0．02、1．55±0．03）显著高于对照组（1．17±0．13）和第3、5天的 MAP 组患者（1．06±0．14、0．87±0．20，F＝4．51，P均＜0．05）。免疫荧光结果显示 CARD9与 Bcl‐10共定位于细胞核，免疫共沉淀 SAP 组 CARD9与Bcl‐10结合程度明显高于对照组和 MAP 组。 Pearson 相关分析表明，AP 患者 PBMC 内 p65 NF‐κB 、p38 MAPK 蛋白磷酸化水平与 CARD9表达水平呈正相关（r＝0．692、0．834，P均＜0．01）。结论 CARD9与NF‐κB 、MAPK 呈正相关，提示 CARD9在 AP 疾病中激活 NF‐κB 和 MAPK 信号通路诱导炎性因子产生。