人重组胱天蛋白酶原-3的表达和体外活化

• 作者: 夏东岚 宋泉声 张颖妹 李现亭 莫晓宁 马大龙
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 胱天蛋白酶-3 半胱氨酸蛋白酶类/代谢 酶激活
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 316-320
• 页数: 5页
• 分类号: TQ464.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-167X.2002.04.002

摘要

目的:建立一个在短时间内获取大量活化胱天蛋白酶-3的方法.方法:将胱天蛋白酶-3酶原的基因从真核表达载体中克隆到原核表达载体pMTY4-His中,在大肠杆菌中以包涵体的形式表达MS2-胱天蛋白酶原-3融合蛋白;将包涵体变性,经酸化和浓缩进行体外活化;对所得蛋白用Western blot和活性试验进行鉴定.结果:构建成pMTY4-His-胱天蛋白酶-3原核表达载体,在大肠杆菌中获得了较高水平表达的胱天蛋白酶原-3酶原-MS2融合蛋白.体外活化后每升诱导菌可获得约10 mg蛋白,用抗胱天蛋白酶-3单克隆抗体证实所得蛋白为胱天蛋白酶原-3,活性试验证实得到高活性的蛋白.结论: 成功地建立了大量获取高活性的胱天蛋白酶-3的方法,为深入研究胱天蛋白酶-3的功能和性质提供物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马大龙	北京大学基础医学院免疫学系	71	944	16.0	28.0
2	张颖妹	北京大学基础医学院免疫学系	24	343	10.0	18.0
3	宋泉声	北京大学基础医学院免疫学系	13	191	6.0	13.0
4	夏东岚	北京大学基础医学院免疫学系	5	38	3.0	5.0
5	莫晓宁	北京大学基础医学院免疫学系	5	33	2.0	5.0
6	李现亭	北京大学基础医学院免疫学系	2	26	2.0	2.0