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摘要:
目的:构建含有Smad7基因3′-UTR区的荧光素酶报告基因载体,利用双荧光素酶报告基因验证MicroR-NA195与其潜在靶基因Smad7的靶向关系。方法:PCR扩增出Smad7基因3′-UTR区片段,以此构建含3′-UTR的荧光素酶报告基因载体(wild type,WT);将miRNA-195与荧光素酶报告重组子共转染至293T细胞中,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性;构建含Smad7基因3′-UTR突变体(mutant,Mut)的荧光素酶报告基因质粒,检测荧光素酶活性变化。结果:测序结果表明,含有Smad7基因3′-UTR区的荧光素酶报告基因载体构建正确;荧光素酶活性实验表明,与对照组相比,miRNA-195可使含Smad7基因3′-UTR区的荧光素酶报告重组子的荧光素酶活性降低40%左右;而定点突变Smad7基因3′-UTR的荧光素酶报告重组子荧光活性未有明显变化。结论:成功构建了Smad7基因3′-UTR区的荧光素酶报告基因载体,而miRNA-195可以直接作用于Smad7基因3′-UTR区,抑制其荧光素酶活性。
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文献信息
篇名 MicroRNA-195与Smad7靶向关系的研究
来源期刊 江苏大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 MicroRNA195 Smad7基因 荧光素酶报告基因 3′-UTR
年,卷(期) 2015,(4) 所属期刊栏目 基础医学
研究方向 页码范围 286-289
页数 4页 分类号 R393
字数 2954字 语种 中文
DOI 10.13312/j.issn.1671-7783.150049
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张国辉 江苏大学附属人民医院心内科 56 198 7.0 10.0
2 芮涛 江苏大学附属人民医院心内科 10 26 3.0 4.0
3 沈冬丽 江苏大学附属人民医院心内科 7 39 3.0 6.0
4 孔彪 江苏大学附属人民医院心内科 5 23 3.0 4.0
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节点文献
MicroRNA195
Smad7基因
荧光素酶报告基因
3′-UTR
研究起点
研究来源
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期刊影响力
江苏大学学报(医学版)
双月刊
1671-7783
32-1669/R
大16开
江苏省镇江市梦溪园巷30号 出版楼5楼
28-192
1991
chi
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